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- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
DTT,免称量蛋白级48 管直销
- 库存:
28
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
务特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
详细介绍:
DTT,免称量蛋白级48 管直销客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
DTT,免称量蛋白级48 管直销注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
DTT,免称量蛋白级48 管直销实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
pMIB/V5-His A(pMIBV5HisA) Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,4X)
多聚甲醛(0.1M 磷酸缓冲液,pH7.4)溶液,4% 人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA Kit
大鼠I型前胶原C末端肽(C I CP)ELISA Kit NMS medium
YRp14-his3delta200(YRp14his3delta200) pcos1EMBL
pBAD24(60908-610)y 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA Kit
人脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA Kit DAB法生物素杂交检测试剂盒
肌酸激酶测试剂盒 pQE-16(pQE16)
pLenti6/TR(pLenti6TR)(60908-4510) Brown-Brenn革兰法细染色试剂盒
石榴红酸盐 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA Kit
植物种属鉴定PCR Mix 5 Halogranum medium
Acetobacterium dehalogenans medium pCMV-PL
Lorist2 兔血管血友病因子/瑞斯托辅因子(VWF)ELISA Kit
人类似cDNA顺序BC027382 ELISA Kit 非冻型血液DNA保存液(100 mL)
HK-2 [HK2]细胞株 pmRi-ZsGreen1(pmRiZsGreen1)
pFA6a-TRP1-PGAL1(pFA6aTRP1PGAL1) Luxol坚牢蓝(95%酒精)溶液,0.1% (Luxol Fast Blue, 0.1% in 95% Alcohol)
酸葡聚糖 大鼠可溶坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA Kit
登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR检测试剂盒 Ekho lake strains medium
pZsGreen1-C1(pZsGreen1C1) pBI221(60908-760)强力霉素盐(脱氧土霉素)标准品 CAS号:标准品 CAS号: 24390-14-5 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
因灭汀(Emamectin-benzoate(苯甲酸盐)) 155569-91-8 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
硫丹(α+β~2+1)标准品 CAS号: 115-29-7 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
草燕灭一水合物 标准品 CAS号:62059-43-2 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
异 标准品 CAS号:72-20-8 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
恩诺沙星 标准品 CAS号:标准品 CAS号:93106-60-6 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
氟环唑 标准品 CAS号:135319-73-2 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
依普菌素 标准品 CAS号:123997-26-2 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
丙草丹 标准品 CAS号:759-94-4 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
红霉素 标准品 CAS号:114-07-8 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
氟消草 标准品 CAS号:55283-68-6 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
DTT,免称量蛋白级48 管直销胺苯磺隆 标准品 CAS号:97780-06-8 100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
乙烯利 标准品 CAS号:16672-87-0 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
乙硫磷 标准品 CAS号:563-12-2 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
乙呋草黄 标准品 CAS号:26225-79-6 250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
乙氧酰胺苯甲酯 标准品 CAS号:100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
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文献和实验液的 pH、盐离子浓度、添加剂(如 5% 甘油、1mM DTT) 等。 原因三 HIS 标签没有表达或丢失或暴露不充分。 建议 1 用 anti-HIS 的抗体进行 WB,检测 HIS 标签是否存在。 建议 2 将蛋白用 4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素变性后,让 HIS 标签充分暴露出来,看是否能与填料结合。 建议 3 改变 HIS 标签的位置或者增加其数目(常用 6-12 个 HIS),增加暴露和结合机会。 建议 4 改变金属结合离子,除了 Ni2+,Cu2+、Zn2+、Co2+ 也可以用来进
)+ 0.5 ul 1 M DTT + 5 ul 200X 蛋白酶抑制剂混合物(PIC),冰上预冷。因此,我们就把所有体积乘以 3,来配制啦,简单的算术题。缓冲液 B(微球菌核酸酶的酶切缓冲液):我们按照实验设计,配了 3 个反应需要的体积,同时加入合适的 DTT(此处我们牢记不能加蛋白酶抑制剂混合物 PIC!!!)。其他:找到固定细胞用的分子生物学级别的 37% 甲醛溶液(我们用的是 SIGMA 生产的 F8775);准备足量预冷的 PBS,用于洗涤细胞;再把离心机也调到 4 度预冷。一切妥妥的,正式开始实验
离子浓度、添加剂(如5%甘油、1mM DTT)等。 原因三 His标签没有表达或丢失或暴露不充分。 建议1 用anti-His的抗体进行WB,检测His标签是否存在。 建议2 将蛋白用4-6M盐酸胍或4-8M尿素变性后,让His标签充分暴露出来,看是否能与填料结合。 建议3 改变His标签的位置或者增加其数目(常用6-12个His),增加暴露和结合机会。 建议4 改变金属结合离子,除了Ni2+,Cu2+、Zn2+、Co2+也可以用来进行His标签的捕获。 2、His标签蛋白结合了,但是洗脱不充分 原因
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