Ad-GFP-LC3B特价优惠

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")Ad-GFP-LC3B特价优惠，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Ad-GFP-LC3B特价优惠
规格：1ml|10×1ml
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
编号：YT159
本品是一种可以表达GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬(autophagy)的检测。

LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3 。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族，其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止，LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个*基酸残基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所酶切而失去了C端的22个*基酸蛋白，从而暴露出C端的甘*酸，人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中，其C端暴露的甘*酸经过一个类似泛素化的过程，以ATG7为E1样激活酶， 以ATG3为E2样连接酶，以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶，在C端甘*酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后，自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切，而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其极强的疏水性，在SDS-PAGE电泳时，LC3B II比LC3B I迁移得更快，其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以斑点的形式表现出来。

自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关，在饥饿等不利的环境条件下， 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。

Ad-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

腺病毒感染细胞后为瞬时表达，通常不会与基因组DNA重组，不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后，有效表达时间通常不少于7天，不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。

百奥莱博的Ad-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统，感染普通的细胞后不能进行扩增和重组，从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。

本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。

本产品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，共可以感染10个孔；如果按照20 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，共可以感染50个孔。如果MOI值提高，则相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值降低，则相应可以感染的孔数会增加。

注意事项：
1. 反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体，请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1)，没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病，可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。

储存条件：-20℃，有效期1～2个月。

欲咨询购买Ad-GFP-LC3B特价优惠，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·DNA上样缓冲液(6X)
编号：YT418
英文名称：6×DNA loading buffer
规格：2ml
本品是一种经过适当改良的常规的六倍浓缩的DNA上样缓冲液。本上样缓冲液以*酚蓝为指示剂，稀释至1X后比重仍然较大，上样时极易下沉，且颜色清晰可见。

储存条件：室温，有效期一年。

·STAT5凝胶迁移探针(10μM)
编号：YT259
英文名称：STAT5 Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT5 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的STAT5结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应，每次标记的探针可以测定约100个样品；或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争，可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

STAT5 consensus oligo的序列如下：
5"-AGA TTT CTA GGA ATT CAA TCC-3"
3"-TCT AAA GAT CCT TAA GTT AGG-5"

本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记，也可以用于生物素标记。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·蛋白去除试剂S
编号：YT294
英文名称：Protein Removal Reagent S(Used For YT293)
规格：3g
本品是用于百奥莱博的总谷胱甘肽检测试剂盒(YT293的专用试剂。总谷胱甘肽检测试剂盒中已经提供了适量的蛋白去除试剂S，但在某些特定情况下，有些用户希望使用较大量的蛋白去除试剂S，可以购买本试剂用于总谷胱甘肽检测试剂盒的相关检测。

注意事项：蛋白去除试剂S溶液必须新鲜配制并限当日使用。

储存条件：4℃，有效期一年。

·TBE Buffer(5X)(TBE 缓冲液)
编号：YT422
英文名称：Tris-Borate-EDTA buffer
规格：500ml
TAE即Tris-硼*(代"酸")-EDTA缓冲液，是常用的DNA电泳缓冲液，常用于PAGE胶，也可以用于琼脂糖凝胶。对于分辨率要求不高时，使用TAE和TBE均可；对于分辨率要求比较高时，较低浓度的胶有利于提高大分子量核酸的分辨率，此时宜使用TAE；而较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率，此时宜使用TBE。TBE(5X)是5倍浓缩的，使用时须根据具体的实验要求用蒸馏水或去离子水稀释成1X或者0.5X后使用。

1×TBE：89mM Tris-Borate、2mM EDTA，pH8.3

储存条件：室温。

·Bcl-xL抗体
编号：YT649
英文名称：anti-Bcl-xL antibody
规格：>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人Bcl-xL蛋白Asp61附近一段多肽作为抗原制备而成的抗Bcl-xL兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Bcl-xL抗体识别的是总Bcl-xL(total Bcl-xL)，可以检测内源性的Bcl-xL，未发现和Bcl-2家族其它蛋白有交叉反应。

Bcl-xL是Bcl-2家族蛋白，在细胞凋亡调节中发挥重要作用。Bcl-xL可以和其它促凋亡蛋白形成异源二聚体而抑制细胞凋亡，也可以直接在线粒体外膜上形成寡聚体通道以在细胞应激时维持线粒体膜的正常状态。Paclitaxel、vinblastine和nocodazole等微管损伤试剂可以通过激活JNK而磷酸化Bcl-xL，从而使Bcl-xL失活。Bcl-x基因通过选择性剪接，可以形成Bcl-xL和Bcl-xS。Bcl-xL含241个*基酸，与Bcl-2有显著同源性；Bcl-xS相当于是Bcl-xL的缺失体，缺失了Bcl-xL在近跨膜区的63个*基酸。Bcl-xL具有抑制细胞凋亡作用，其在肿瘤形成中的作用已得到较为广泛的研究。

组份：
Bcl-xL抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
宿主：兔
免疫原：经过适当修饰的人工合成的人Bcl-xL蛋白Asp61附近一段多肽
Bcl-xL分子量：～30kD
克隆性：单克隆抗体
应用：WB,IP,IHC,FCM
推荐稀释比例：WB（1:1000）, IP（1:100）, IHC（1:300）, FCM（1:400）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·蛋白浓度测定试剂盒(BCA法)
编号：YT037
英文名称：BCA Protein Assay Kit
规格：5000次|500次|200次
本试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。

本试剂盒灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl。在50-2000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。不适用BCA法时建议试用百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。

试剂盒组份：
BCA试剂 A——————500ml×2
BCA试剂 B——————30ml
蛋白标准(BSA)————30ml×2
蛋白标准配制液 ———5ml

注意事项：
1. 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
2. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。
3. 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
4. EDTA浓度必须小于10mM，不兼容EGTA。不适用BCA法时，请试用百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。

储存条件：室温。

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