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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
MDA-MB-435S(人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
MDA-MB-435S细胞产品概述:
| MDA-MB-435S 人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞
|
|
| 细胞名称 |
MDA-MB-435S(人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞) |
| 种属 |
人 |
| 年龄(性别) |
女;31岁 |
| 组织来源 |
乳腺;乳房;导管;导管癌;胸腺渗出液 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
纺锤形细胞 |
| 背景描述 |
MDA-MB-435S细胞是一种纺锤形的细胞,1976年由其亲本MDA-MB-435细胞中筛选得到。MDA-MB-435细胞是从31岁的转移性乳腺导管腺癌女性患者胸水中分离得到。当用荧光染料对微管蛋白进行染色时,亲本细胞显现散布特征(Ⅱ型)。最近通过cDNA阵列研究表明,亲本(MDA-MB-435细胞)可归入黑素瘤起源。 |
| 生长培养基 |
DMEM高糖+0.01mg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温MDA-MB-435S细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
MDA-MB-435S细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购MDA-MB-435S细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
MDA-MB-435S细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人胚胎,皮肤,肌肉;M-7 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎成纤维细胞;PA317 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人胚胎,皮肤,肌肉;M-20 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠SRSV转化的3T3细胞;SRSV/3T3 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swissalbino 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swissalbino 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929[L929] 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠巨噬细胞;Ana-1 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠皮下结缔组织细胞;A-9 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠B淋巴细胞;WEHI231 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠肾上腺皮质细胞;Y1 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
恒河猴肾细胞;LLC-MK2 猴源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14;MC3T3-E1Subclone14 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
牛肾细胞;MDBK 牛源 1×10^6 细胞数/ml
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4[FRhK4] 猴源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠颅盖成纤维细胞;OP9 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7) 貂源 1×10^6 细胞数/ml
有袋大鼠肾细胞;PtK1(NBL-3) 大鼠源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934) 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
非洲绿猴肾细胞;VERO 猴源 1×10^6 细胞数/ml
负鼠肾近曲小管上皮细胞;OK 1×10^6 细胞数/ml
小鼠胚胎成纤维细胞;C3H/10T1/2,Clone8 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
非洲绿猴肾细胞;CV-1 猴源 1×10^6 细胞数/ml
蚊子幼虫体细胞;AedesalbopictuscloneC6/36 蚊子源 1×10^6 细胞数/ml
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 猴源 1×10^6 细胞数/ml
猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞;RF/6A 猴源 1×10^6 细胞数/ml
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4Ig-24 仓鼠源 1×10^6 细胞数/ml
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7 猴源 1×10^6 细胞数/ml
猫肾细胞;F81 猫源 1×10^6 细胞数/ml
鸡胚成纤维细胞;UMNSAH/DF-1 1×10^6 细胞数/ml
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8 猴源 1×10^6 细胞数/ml
犬肾细胞;MDCK(NBL-2) 犬源 1×10^6 细胞数/ml
犬肾细胞;MDCK(NBL-2) 犬源 1×10^6 细胞数/ml
牛胚气管细胞;EBTr(NBL-4) 牛源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠髋动脉内皮细胞;PIEC 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
长尾绿猴胚胎细胞;4179 猴源 1×10^6 细胞数/ml
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文献和实验乙酰肝素和巢蛋白组成的混合物,在4℃为液体,而在37℃则聚合形成一种凝胶。③裸鼠的选择Balb/c、 nu/nu雌性裸鼠 (SPF级),4-6周龄,体重18-22g,预实验选用Balb/c小鼠,用于mfp的解剖。 MDA-MB-435S细胞的成瘤情况 3、材料 常规器械:15号小圆刀、小刀柄、1ml,5ml空针、橡筋、定鼠板、钉子、止血钳、眼科剪、口罩帽子手套; 药品准备:安氟醚、NS、酒精、脱毛剂(硫化钠)、肾上腺素; 显微外科器械:8倍目视显微镜或16倍台式显微镜、显微手术器械(组织剪、持针
【共享】待发表的综述:RNAi在药物最佳靶点筛选和鉴定中的应用
证实血管内皮细胞生长因子(VEGF)能够刺激血管生成以及维持肿瘤细胞的生存。Chung等人阐明了人乳头瘤细胞系中整联蛋白α6β4调节VEGF翻译过程中的作用。在原来不表达内源性α6β4 的MDA-MB-435细胞中过表达α6β4,使其在去血清的情况下不发生凋亡。在另一表达内源α6β4的细胞系中,使用siRNA靶向整联蛋白β4亚基引起β4和VEGF的表达下降,细胞凋亡上升。这些结果证明存在其他翻译起始信号通路调节机制,同时揭示了α6β4是VEGF翻译的重要调节因子,因此也为抗肿瘤药物的研发提供了一个
)或者具有简单序列的不同数量的重复片段(STR-PCR)的引物进行专一性基因片段PCR扩增。CGE和ESCE都可以分析在ARMS-PCR基因PCR扩增中的单碱基取代产物。选择合适的多组PCR引物对可以同时对多个突变位点进行分析,Donohoe等[1]利用多重ARMS-PCR扩增反应鉴定了阿朴脂蛋白E基因。对于杂合子样品,STR-PCR 有一定困难,这包括长等位基因低的扩增效率和PCR扩增受阻(如非转一性片段的扩增),这两种情况都会引起低的扩增条带。传统凝胶电泳需要放射性标记来进行分析。利用ESCE方法
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