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- 2025年07月13日
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一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务
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22
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上海一研
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务详细介绍：
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
氨苄素钠（25GM） Ampicillin， Sodium Salt， CAS# 69-52-3； MW 371.4； USP
L-硫氨（100GM） L-Methionine， CAS# 63-68-3； MW 149.21； ≥99%； USP
一水磷二氢钠（100GM） Sodium Phosphate， Monobasic， Monohydrate， USP Grade； CAS# 10049-21-5； Formula:NaH2PO4
氯化钠（5KG） Sodium Chloride， High purity grade.
5（6）-TMR C6马来酰亚胺 5（6）-TMR C6 maleimide
生物素-X，琥珀酰亚胺酯 Biotin-X， succinimidyl ester
FAM-cAMP磷二酯酶IV底物 绿色荧光 FAM-cAMP PDE IV substrate Green fluorescence
新型钙离子荧光探针Quest Fluo-8FF， 钾盐 Quest Fluo-8FF， potassium salt
iFluor 555琥珀酰SE iFluor 555 succinimidyl ester
Annexin V-iFluor 488偶联物 Annexin V-iFluor 488 conjugate
Cyanine 5。5， 双琥珀酰亚胺脂 [相当于Cy5。5 双NHS脂] Cyanine 5。5， bissuccinimidyl ester [equivalent to Cy5。5 bisNHS ester]
达氟沙星-BSA偶联物[用于ELISA] Danofloxacin-BSA Conjugate
GQ-16 （10 mg） 5Z-[（5-bromo-2-methoxyphenyl）methylene]-3-[（4-methylphenyl）methyl]-2，4-thiazolidinedione； GQ-16
5-IT （10 mg） α-methyl-1H-indole-5-ethanamine； 5-API|5-（2-Aminopropyl）indole； 5-IT
3-Pyridylamide oxime （500 mg） N-hydroxy-3-pyridinecarboximidamide； N-Hydroxynicotinamidine|NSC 208697|NSC 220324； 3-Pyridylamide oxime
16（R）-Iloprost （500 ug） 6，9α-methylene-11α，15S-dihydroxy-16R-methyl-prosta-5E，13E-dien-18-yn-1-oic acid； 16（R）-Iloprost
JZL 184 （10 mg） 4-nitrophenyl-4-（dibenzo[d][1，3]dioxol-5-yl（hydroxy）methyl）peridine-1-carboxylate； JZL 184 异常汉逊酵母 Hansenula anomala灵芝 Ganoderma lucidium
玫瑰产色链霉菌 Streptomyces roseochromogenes褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
AGS(人胃腺细胞)Bcap-37(人腺细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae蕈青霉 Penicillium paxilli
金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人肺腺细胞Protein A Affinity MagBeads/Protein A 磁性亲和纯化介质H1299
Caco-2，人结直肠腺细胞暂无 Cobetia marina
鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus黑木耳 Auricularia auricula
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis中华鳖脾来源细胞
RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞)小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基
荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens片球菌 Pediococcus sp.
大孢子链霉菌 Streptomyces macrosporeus费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii
狗肺成纤维样细胞NCI-H1688(人典型小细胞肺细胞)DogL1
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae伞枝梨霉 Absidia corymbifera
牛链球菌 Streptococcus bovis棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠皮肤肥大细胞完全培养基
Daudi(人淋巴瘤细胞)大鼠心肌成纤维细胞完全培养基
中间葡萄球菌 Staphylococcus intermedius状丝孢酵母 Trichosporon capitatum
消化杆菌 Lactobacillus alimentarius中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
Eca-109(人食管细胞)LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务详细介绍：
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
氨苄素钠（25GM） Ampicillin， Sodium Salt， CAS# 69-52-3； MW 371.4； USP
L-硫氨（100GM） L-Methionine， CAS# 63-68-3； MW 149.21； ≥99%； USP
一水磷二氢钠（100GM） Sodium Phosphate， Monobasic， Monohydrate， USP Grade； CAS# 10049-21-5； Formula:NaH2PO4
氯化钠（5KG） Sodium Chloride， High purity grade.
5（6）-TMR C6马来酰亚胺 5（6）-TMR C6 maleimide
生物素-X，琥珀酰亚胺酯 Biotin-X， succinimidyl ester
FAM-cAMP磷二酯酶IV底物 绿色荧光 FAM-cAMP PDE IV substrate Green fluorescence
新型钙离子荧光探针Quest Fluo-8FF， 钾盐 Quest Fluo-8FF， potassium salt
iFluor 555琥珀酰SE iFluor 555 succinimidyl ester
Annexin V-iFluor 488偶联物 Annexin V-iFluor 488 conjugate
Cyanine 5。5， 双琥珀酰亚胺脂 [相当于Cy5。5 双NHS脂] Cyanine 5。5， bissuccinimidyl ester [equivalent to Cy5。5 bisNHS ester]
达氟沙星-BSA偶联物[用于ELISA] Danofloxacin-BSA Conjugate
GQ-16 （10 mg） 5Z-[（5-bromo-2-methoxyphenyl）methylene]-3-[（4-methylphenyl）methyl]-2，4-thiazolidinedione； GQ-16
5-IT （10 mg） α-methyl-1H-indole-5-ethanamine； 5-API|5-（2-Aminopropyl）indole； 5-IT
3-Pyridylamide oxime （500 mg） N-hydroxy-3-pyridinecarboximidamide； N-Hydroxynicotinamidine|NSC 208697|NSC 220324； 3-Pyridylamide oxime
16（R）-Iloprost （500 ug） 6，9α-methylene-11α，15S-dihydroxy-16R-methyl-prosta-5E，13E-dien-18-yn-1-oic acid； 16（R）-Iloprost
JZL 184 （10 mg） 4-nitrophenyl-4-（dibenzo[d][1，3]dioxol-5-yl（hydroxy）methyl）peridine-1-carboxylate； JZL 184 异常汉逊酵母 Hansenula anomala灵芝 Ganoderma lucidium
玫瑰产色链霉菌 Streptomyces roseochromogenes褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
AGS(人胃腺细胞)Bcap-37(人腺细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae蕈青霉 Penicillium paxilli
金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人肺腺细胞Protein A Affinity MagBeads/Protein A 磁性亲和纯化介质H1299
Caco-2，人结直肠腺细胞暂无 Cobetia marina
鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus黑木耳 Auricularia auricula
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis中华鳖脾来源细胞
RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞)小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基
荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens片球菌 Pediococcus sp.
大孢子链霉菌 Streptomyces macrosporeus费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii
狗肺成纤维样细胞NCI-H1688(人典型小细胞肺细胞)DogL1
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae伞枝梨霉 Absidia corymbifera
牛链球菌 Streptococcus bovis棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠皮肤肥大细胞完全培养基
Daudi(人淋巴瘤细胞)大鼠心肌成纤维细胞完全培养基
中间葡萄球菌 Staphylococcus intermedius状丝孢酵母 Trichosporon capitatum
消化杆菌 Lactobacillus alimentarius中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
Eca-109(人食管细胞)LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次售后服务公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
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