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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
KB(人口腔表皮样癌细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
KB细胞产品概述:
| KB 人口腔表皮样癌细胞
|
|
| 细胞名称 |
KB(人口腔表皮样癌细胞) |
| 种属 |
人 |
| 年龄(性别) |
|
| 组织来源 |
|
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 背景描述 |
最初认为,KB细胞源自口腔表皮癌,但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,KB细胞的起源是HeLa细胞污染的。KB细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性,有报告称KB细胞含有人乳头状瘤病毒18(HPV-18)序列。 |
| 生长培养基 |
MEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温KB细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
KB细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购KB细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
KB细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
肾小管上皮细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
胚胎成纤维细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
皮肤成纤维细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
心肌细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
外周血树突状细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
外周血自然杀伤细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人肾上皮细胞 293 人源 1×10^6 细胞数/ml
大鼠胸大动脉平滑肌细胞 A7r5 大鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人胃癌细胞 AGS 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠黑色素瘤细胞 B16F10 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人支气管上皮细胞 BEAS-2B 人源 1×10^6 细胞数/ml
人肝癌细胞 Bel7404 人源 1×10^6 细胞数/ml
人胰腺腺癌细胞 BxPC-3 人源 1×10^6 细胞数/ml
中国仓鼠卵巢细胞 CHO 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人前列腺癌细胞 DU145 人源 1×10^6 细胞数/ml
人食管癌细胞 EC109 人源 1×10^6 细胞数/ml
大鼠心肌细胞 H9C2 大鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人永生化表皮细胞 HaCaT 人源 1×10^6 细胞数/ml
人主动脉平滑肌细胞 HASMC 人源 1×10^6 细胞数/ml
人结肠癌细胞 HCT116 人源 1×10^6 细胞数/ml
人子宫颈癌细胞 Hela 人源 1×10^6 细胞数/ml
人正常胰腺导管上皮细胞 HPDE6-C7 人源 1×10^6 细胞数/ml
人脐静脉血管内皮细胞 HUVEC-12 人源 1×10^6 细胞数/ml
人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 人源 1×10^6 细胞数/ml
人胰腺癌细胞 PANC-1 人源 1×10^6 细胞数/ml
人前列腺癌细胞 PC-3 人源 1×10^6 细胞数/ml
大鼠肺上皮Ⅱ型细胞 RLE-6TN 大鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人肾上皮细胞 293T 人源 1×10^6 细胞数/ml
人软骨细胞 HC 人源 1×10^6 细胞数/ml
成人软骨细胞-骨性关节炎 HC-OA 人源 1×10^6 细胞数/ml
人胶质母细胞瘤 u251 人源 1×10^6 细胞数/ml
人急性单核细胞白血病单核细胞THP-1 人源 1×10^6 细胞数/ml
人卵巢癌细胞HO8910 人源 1×10^6 细胞数/ml
人结肠癌细胞HCT8 人源 1×10^6 细胞数/ml
人白血病细胞U937 人源 1×10^6 细胞数/ml
人恶性胶质母细胞瘤细胞U87MG 人源 1×10^6 细胞数/ml
人乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7A 人源 1×10^6 细胞数/ml
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
短串联重复序列(short tandem repeat,STR),又称为微卫星DNA ,重复单位为2-6bp,重复次数10~60多次,在DNA复制过程中的滑动、复制、修复过程中滑动链与互补链的碱基错配,从而导致一个或几个重复单位的缺失或插入,形成STR的多态性,主要应用于遗传连锁图谱分析、家系鉴定、身份认证等领域,同时也是鉴定细胞株被错误识别和交叉污染的主要工具。细胞株被错误识别及交叉污染的现象还是比较普遍的,虽然科研工作者使用各种各样的传统方法来鉴定细胞,但细胞交叉污染的问题却有增无减
刚刚在中国科学院昆明细胞库看到他们今年最新公布的错误鉴定和交叉污染的细胞,共 60 个细胞系,STR 检测结果和备检细胞系的名称相差甚远,大家赶紧去看看自己的细胞是否在列吧。 很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行, 这些细胞可能是从细胞库 (如美国 ATCC,American Type Culture Collection) 得来,也可能是受赠于其它研究人员,尤其在中国,目前细胞的传播太复杂,无序,很多都不是通过正规途径获得,如友情赠送等。 据统计,约有 30% 细胞系被交叉
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