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- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务
- 库存:
52
- 供应商:
上海一研
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
Moxifloxacin (hydrochloride) (100 mg) 1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-7-[(4aS,7aS)-octahydro-6H-pyrrolo[3,4-b]pyridin-6-yl]-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid, monohydrochloride; Avelox|BAY 12-8039; Moxifloxacin (hydrochloride)
4(Z),7(Z)-Decadienoic Acid-d5 (500 ug) (4Z,7Z)-deca-4,7-dienoic-9,9’,10,10,10-d5 acid; 4(Z),7(Z)-Decadienoic Acid-d5
Suc-AAPF-pNA (25 mg) N-(3-carboxy-1-oxopropyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-nitrophenyl)-L-phenylalaninamide; Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide; Suc-AAPF-pNA
R-(-)-Deprenyl (hydrochloride) (1 g) (R)-N,α-dimethyl-N-2-propyn-1-yl-benzeneethanamine, monohydrochloride; Selegiline|L-Deprenyl; R-(-)-Deprenyl (hydrochloride)
1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-PE (50 mg) 1-palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-phosphatidylethanolamine; 1,3-POPE|1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-Phosphoethanolamine; 1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-PE
ML-098 (5 mg) 1-
IPBT-5CA (1 g) 1-(1-methylethyl)-1H-benzotriazole-5-carboxylic acid; IBC-293; IPBT-5CA
TAF1 bromodomains 1 and 2 Ligand/APC Acceptor Mixture (2100 wells) TAF1 bromodomains 1 and 2 Ligand/APC Acceptor Mixture
4-methyl Erlotinib (1 mg) N-(3-ethynyl-4-methylphenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-quinazolinamine; 4-methyl Erlotinib
10-Nitrooleate-d17 (500 ug) 10-Nitrooleic Acid-d17|10-nitro-9-trans-Octadecenoic Acid-d17; 10-nitro-9E-octadecenoic-11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-d17 acid
NADP+ (sodium salt hydrate) (100 mg) Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate; P’→5’-ester with 3-(aminocarbonyl)-1-β-D-ribofuranosylpyridinium 2’-(dihydrogen phosphate) adenosine 5’-(trihydrogen diphosphate), inner salt, monosodium salt, tetrahydrate
(+)-Etomoxir (sodium salt) (25 mg) (R)-(+)-Etomoxir; (2R)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]-2-oxiranecarboxylic acid sodium salt (1:1)
(±)4-HDoHE (100 ug) (±)4-hydroxy-5E,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 4-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)4-HDoHE
(±)11,12-DHET (250 ug) (±)11,12-dihydroxy-5Z,8Z,14Z-eicosatrienoic acid; (±)11,12-DiHETrE; (±)11,12-DHET
Halofuginone (hydrochloride) (5 mg) 7-bromo-6-chloro-3-[3-[(2R,3S)-3-hydroxy-2-peridinyl]-2-oxopropyl]-4(3H)-quinazolinone, monohydrochloride
2C-TFM (hydrochloride) (1 mg) 2C-CF3; 2,5-dimethoxy-4-(trifluoromethyl)-benzeneethanamine, monohydrochloride
Desmosterol (5 mg) 24-dehydro Cholesterol|NSC 226126; (3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol
PFI-3 (5 mg) (E)-1-(2-hydroxyphenyl)-3-((1R,4R)-5-(pyridin-2-yl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)prop-2-en-1-one
EGFR Inhibitor (1 mg) Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitor; N-[3-[[6-[[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]amino]phenyl]枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis节杆菌 Arthrobacter sp.
FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源)
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. Lactis酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti葡枝根霉
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)人肾足突细胞完全培养基
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosusHela, 人宫颈细胞系
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes嗜氨微杆菌 Microbacterium ammoniphilum
小细胞肺香菇 Lentinula edodesNCI-H345(悬浮)
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL售后服务人真皮微血管内皮细胞完全培养基Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)
克鲁斯假丝酵母 Candida krusei酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大肠杆菌 Escherichia coli无色透链霉菌 Streptomyces hyalinus
FO(小鼠骨髓瘤细胞)人脑静脉血管内皮细胞完全培养基
酒假丝酵母 Candida kefyrCSC, 小鼠心肌细胞
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosqrum酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
MLA144臂猿淋巴瘤细胞庆丰链霉菌 Streptomyces qingfengmyceticusMLA144gersion
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformisA9(小鼠皮下结缔组织细胞)
烟草疫霉* Phytophthora nicotianae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人成纤维瘤细胞玉蜀黍蠕孢 Helminthosporium maydisHT1080
普雷恩毛霉 Mucor prain
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文献和实验20min。4℃5000rpm离心5min,去上清。1.1.6. 加入4ml预冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮。1.1.7. 农杆菌悬浮液分装于无菌Eppendorf管中,每管200μl冻存于-70℃。1.2. 双元载体转化农杆菌EHA105取1μg左右的质粒DNA加入到200ml EHA105感受态细胞中,混匀后,冰浴30min,-70℃放置10min 。再在37℃水浴5min或42℃水浴1min,接着冰浴2min,加入800mlYM液体培养基28℃,175rpm摇培3hr
,轻轻悬浮细胞,冰上放置20min。4℃5000rpm离心5min,去上清。 1.1.6. 加入4ml预冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮。 1.1.7. 农杆菌悬浮液分装于无菌Eppendorf管中,每管200μl冻存于-70℃。 1.2. 双元载体转化农杆菌EHA105 取1μg左右的质粒DNA加入到200ml EHA105感受态细胞中,混匀后,冰浴30min,-70℃放置10min 。再在37℃水浴5min或42℃水浴1min,接着冰浴2min,加入800mlYM
埃希菌?( Eco ) ATCC25922 、标准产酶 Eco ( TEM-26 )作对照。 3. PCR 产物的纯化、克隆:按照 PCR 产物纯化 kit ( QIAgen )的要求,纯化目的片断,取 3μl 与 pGEM-Teasy Vector(Promega) 连接。连接反应液转化至 EcoDH 5a 感受态细胞,经含氨苄西林( Amp50μg/ml )的麦康凯培养基筛选。挑取白色菌落,接种于含 Amp 的 LB 培养液中, 37 ℃ 培养过夜。经 EcoRI ( Takara
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










