BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书

BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书详细介绍：

BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
Pon A； 25-Deoxy-20-hydroxyecdysone； 25-Deoxyecdysterone； AI3-44686； 2β，3β，14α，20R，22R-Pentahydroxy-5β-cholest-7-en-6-one    Ponasterone A
4-{6-[4-（3-Cyclopropyl-ureido）-phenyl]-4-morpholin-4-yl-pyrazolo[3，4-d]pyrimidin-1-yl}-peridine-1-carboxylic acid methyl ester    mTOR Inhibitor， WYE-23
Sulfosuccinimidyl 6-（biotinamido） Hexanoate； Biotinamidohexanoic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt    Sulfo-NHS-LC-Biotin
Carbonyl cyanide 4-（trifluoromethoxy）phenylhydrazone    FCCP
2-4（4-methylphenyl）-1，2-benzisothiazol-3（2H）-one    Jumonji HDM Inhibitor， PBIT
Ac-His-Pro-Phe-Val-Statine-Leu-Phe-NH    Rat renin inhibitor peptide
4-[4-（Trifluoromethyl）phenyl]-N-（6-Fluoro-1H-indazol-5-yl）-2-methyl-6-oxo-1，4，5，6-tetrahydro-3-pyridinecarboxamide； GSK429286    GSK429286A
（2R，    Phleomycin
Rabbit IgG， 1 mg    Rabbit IgG
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V， pH – 7.0    Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V， pH – 7.0
Lipase Substrate （1。2 ml）    Lipase Substrate
Quinine hemisulfate    Quinine hemisulfate  Protein A-AgaroseProtein A琼脂糖凝胶小鼠胰腺上皮细胞完全培养基国产gersion
暂无 Pseudidiomarina sediminum人冠状动脉内皮细胞完全培养基
黑木耳 Auricularia auricula葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
中华鳖心肌来源细胞植物杆菌 Lactobacillus plantarumCSSTH1
小鼠子宫颈上皮细胞完全培养基C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)
皮状丝孢酵母 Trichosporon cutaneum酒假丝酵母 Candida kefyr
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
NCI-H1703(人肺鳞细胞)MFC(小鼠胃细胞)gersion
BL21 感受态细胞0.1 mL×10说明书宇佐美曲霉变种 Aspergillus usamii var.点青霉 Penicillium notatum
异酒香酵母 Brettanomyces anomalus微紫青霉 Penicillium janthinellum
小鼠皮下结缔组织细胞人表皮黑色素细胞完全培养基A9
大鼠主动脉内皮细胞完全培养基栖糖蜜棒杆菌 Corynebacterium melassecola
状丝孢酵母 Trichosporon capitatum灵芝 Ganoderma lucidium
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiHanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)
Lncap clone FGC(人前列腺细胞)大鼠颌下腺上皮细胞完全培养基
嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus屎肠球菌 Enterococcus faecium     
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5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等