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- 2025年07月15日
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XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书
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27
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上海一研
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
Cafestol （10 mg） 3bS，4，5，6，7R，8R，9，10，10aR，10bS，11，12-dodecahydro-7-hydroxy-10b-methyl-5aS，8-methano-5aH-cyclohepta[5，6]naphtho[2，1-b]furan-7-methanol； Cafestol
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 （500 ug） 9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-17-phenyl-18，19，20-trinor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 17-phenyl trinor PGE2； 17-phenyl trinor Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α diethyl amide （10 mg） N，N-diethyl-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； PGF2α-NEt2|Dinoprost diethyl amide； Prostaglandin F2α diethyl amide
Unoprostone （5 mg） 9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-13，14-dihydro-15-oxo-20a，20b-dihomoprost-5-en-1-oic acid； 13，14-dihydro-15-keto-20-ethyl Prostaglandin F2α|13，14-dihydro-15-keto-20-ethyl PGF2α； Unoprostone
Lisinopril （500 mg） N2-[（1S）-1-carboxy-3-phenylpropyl]-L-lysyl-L-proline； MK 521|MK 522； Lisinopril
Δ12-Prostaglandin J2 （500 ug） 11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z，9，12E-trien-1-oic acid； Δ12-PGJ2； Δ12-Prostaglandin J2
11-trans Leukotriene D4 （50 ug） 5S-hydroxy-6R-（S-cysteinylglycinyl）-7E，9E，11E，14Z-eicosatetraenoic acid； 11-trans LTD4； 11-trans Leukotriene D4
9（S）-HODE-d4 （100 ug） 9S-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 9（S）-HODE-d4
15-OxoEDE （100 ug） 15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE
8-Isoprostane Affinity Column （20 ml） （1 ea） 8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane Affinity Column （20 ml）
Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum （100 dtn） Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum
15（S）-HpEDE （100 ug） 15S-hydroperoxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HpEDE
Transcription Factor p53 Designer Positive Control （1 ea） Transcription Factor p53 Designer Positive Control
Tris-Glycine Stock Solution （10X） （500 mL） Tris-Glycine Stock Solution （10X）
Azelaoyl PAF （10 mg） 1-O-hexadecyl-2-O-（9-carboxyoctanoyl）-sn-glyceryl-3-phosphocholine； Azelaoyl PAF
Oleyl Trifluoromethyl Ketone （1 mg） 1，1，1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one； OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone； Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Myeloperoxidase Control （1 ea） Myeloperoxidase Control 人十二指肠腺细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium melilotiHuTu-80
HNE2, 人鼻咽细胞系人绒毛膜细胞
屎肠球菌 Enterococcus faeciumNIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系
香菇 Lentinula edodes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)坚强芽胞杆菌 Bacillus firmus500次
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基
链霉菌 Streptomyces sp.弯曲假单胞菌 Pseudomonus geniculata
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书人脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基香菇 Lentinula edodes
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓BGC-803(人胃细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae短柄帚霉 Scopulariopsis brevicaulis
庆丰链霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus根瘤菌 Rhizobium sp.
AAV-293(人胚肾细胞)Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白色绿僵菌 Metarhizium album香菇 Lentinula edodes
人肺动脉成纤维细胞完全培养基人套细胞淋巴瘤细胞
细胞名称HT-29, 人结肠细胞
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
Cafestol （10 mg） 3bS，4，5，6，7R，8R，9，10，10aR，10bS，11，12-dodecahydro-7-hydroxy-10b-methyl-5aS，8-methano-5aH-cyclohepta[5，6]naphtho[2，1-b]furan-7-methanol； Cafestol
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 （500 ug） 9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-17-phenyl-18，19，20-trinor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 17-phenyl trinor PGE2； 17-phenyl trinor Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α diethyl amide （10 mg） N，N-diethyl-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； PGF2α-NEt2|Dinoprost diethyl amide； Prostaglandin F2α diethyl amide
Unoprostone （5 mg） 9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-13，14-dihydro-15-oxo-20a，20b-dihomoprost-5-en-1-oic acid； 13，14-dihydro-15-keto-20-ethyl Prostaglandin F2α|13，14-dihydro-15-keto-20-ethyl PGF2α； Unoprostone
Lisinopril （500 mg） N2-[（1S）-1-carboxy-3-phenylpropyl]-L-lysyl-L-proline； MK 521|MK 522； Lisinopril
Δ12-Prostaglandin J2 （500 ug） 11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z，9，12E-trien-1-oic acid； Δ12-PGJ2； Δ12-Prostaglandin J2
11-trans Leukotriene D4 （50 ug） 5S-hydroxy-6R-（S-cysteinylglycinyl）-7E，9E，11E，14Z-eicosatetraenoic acid； 11-trans LTD4； 11-trans Leukotriene D4
9（S）-HODE-d4 （100 ug） 9S-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 9（S）-HODE-d4
15-OxoEDE （100 ug） 15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE
8-Isoprostane Affinity Column （20 ml） （1 ea） 8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane Affinity Column （20 ml）
Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum （100 dtn） Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum
15（S）-HpEDE （100 ug） 15S-hydroperoxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HpEDE
Transcription Factor p53 Designer Positive Control （1 ea） Transcription Factor p53 Designer Positive Control
Tris-Glycine Stock Solution （10X） （500 mL） Tris-Glycine Stock Solution （10X）
Azelaoyl PAF （10 mg） 1-O-hexadecyl-2-O-（9-carboxyoctanoyl）-sn-glyceryl-3-phosphocholine； Azelaoyl PAF
Oleyl Trifluoromethyl Ketone （1 mg） 1，1，1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one； OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone； Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Myeloperoxidase Control （1 ea） Myeloperoxidase Control 人十二指肠腺细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium melilotiHuTu-80
HNE2, 人鼻咽细胞系人绒毛膜细胞
屎肠球菌 Enterococcus faeciumNIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系
香菇 Lentinula edodes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
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酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基
链霉菌 Streptomyces sp.弯曲假单胞菌 Pseudomonus geniculata
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书人脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基香菇 Lentinula edodes
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓BGC-803(人胃细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae短柄帚霉 Scopulariopsis brevicaulis
庆丰链霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus根瘤菌 Rhizobium sp.
AAV-293(人胚肾细胞)Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白色绿僵菌 Metarhizium album香菇 Lentinula edodes
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细胞名称HT-29, 人结肠细胞
XL1-Blue 化学感受态细胞0.1mL×10说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
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一般指青霉属（Penicillium）。为分布很广的半知菌纲中的一属，和曲霉属有亲缘关系，有二百几十种，代表种是灰绿青霉（ Penicillium glaucum），从土壤或空气中很易分离，分枝成帚状的分生孢子从菌丝体伸向空中，各顶端的小梗产生链状的青绿—褐色的分生孢子。根据分生孢子顶端的膨大与否，与曲霉属（ AsPergillus）相区别。其语源来自其形状（帚状， Penicillus）。子囊壳为封闭型。该属菌产生一种特殊物质。自从弗莱明（ A． Fleming， 1929）发现特异
Celestine Blue 2.5g Ferric Ammonium Sulphate (Iron Alum) 25g Glycerin 70ml Distilled water 500ml Dissolve ferric ammonium sulphate in cold distilled water. Add celestine blue and boil for a few mins. Cool, filter and add glycerin
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