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SURE 化学感受态细胞0.1mL×10价格
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23
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上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
SURE 化学感受态细胞0.1mL×10价格技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
SURE 化学感受态细胞0.1mL×10价格操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
生物素标记二基化组蛋白H3K79多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K79 Peptide (200 ul)
CpG岛全基化的人类基因组DNA Fully CpG Methylated Human Genomic DNA (10 ug/100 ul)
Boc-D-FMK, Caspase抑制剂(氟基酮) Boc-D-FMK
LY317615, LY-317615, D04015 Enzastaurin (LY317615)
3,4’,5-Trihydroxy-trans-stilbene, 5-[(1E)-2-(4-Hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol Resveratrol
1,3-Diazacyclopenta-2,4-diene; 1,3-diazole Imidazole, MegaPure
1-[1-[4,4-bis(4-Fluorophenyl)butyl]-4-peridinyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-one Pimozide
6-[[2-[[2-(2S)-2-Cyano-1-pyrrolidinyl]-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino-3-pyridinecarbononitrile Dihydrochloride DPP IV Inhibitor, NVP DPP 728
Halochondrine A, Sodium Salt; OA Okadaic acid, Sodium Salt
2-(4-(2-Methylpyridin-4-yl)phenyl)-N-4-(pyridin-3-yl)phenyl)acetamide Wnt Antagonist, C59
2β,3β,5β,11α,14α,20R,22R-Heptahydroxycholest-7-en-6-one Muristerone A
(2E)-1-[2,4-Dihydroxy-6-methoxy-3-(3-methyl-2-buten-1-yl)phenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)- 2-propen-1-one Xanthohumol
N-succinimidyl-3-(2-pyridyldithio)propionate; 3-(2-Pyridyldithio)propionic acid N-hydroxysuccinimide ester; 3-(2-Pyridyldithio)propionic acid NHS ester SPDP Crosslinker
3-Ethyl 5-methyl 4-(2,3-dichlorophenyl)-2,6-dimethyl-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylate Felodipine
2-Acetylnaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione; BBI608 Cancer Cell Stemness Inhibitor, BBI608
trans-4-[[(5S)-5-[[[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]methyl](2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)amino]-2,3,4,5-tetrahydro-7,9-dimethyl-1H-1-benzazepin-1-yl]methyl]- cyclohexanecarboxylic acid; LY2484595 Evacetrapib 人膀胱上皮细胞完全培养基嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞大豆慢生根瘤菌
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人结肠春新碱耐药株
平菇 Pleurotus sp.酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Ampicillin(100mg/ml,1000X)鬼伞属 Bradyrhizobium vigna5*1ml
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki
黄绿绿僵菌小孢变种 Metarhizium flavoviride var. minus大鼠脉络膜血管细胞完全培养基
人肝细胞香菇属 Lentinula sp.Hep 3B
THP-1人单核白血病细胞香菇 Lentinula edodes
鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus293FT(人胚肾细胞)
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis藤黄微球菌 Micrococcus luteus
SF126(人脑瘤细胞)苜蓿中华根瘤菌
SURE 化学感受态细胞0.1mL×10价格沟肠杆菌 Enterobacter cloacaeRaw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
葡萄孢 Botrytis sp.嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
黑化大家鼠肺成纤维样细胞绿色木霉 Trichoderma virideNRL1
人脐带血单个核细胞人脐动脉内皮细胞完全培养基
凝结芽孢杆菌 Bacillus coagulans 细胞名称
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna异常汉逊酵母 Hansenula anomala
Hce-8693(人盲肠腺细胞(未分化))褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
SURE 化学感受态细胞0.1mL×10价格公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
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3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
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6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
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9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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文献和实验min离心10min(从这一步开始,所有操作均在冰上进行,速度尽量快而稳);(3) 倒净上清培养液,用1ml冰冷的0.1mo1/L CaCl2溶液轻轻悬浮细胞,冰浴;(4) 0~4℃,4000r/min离心10min;(5) 弃去上清液,加入500µll冰冷的0.1mo1/L CaCl2溶液,小心悬浮细胞。0~4℃,4000r/min离心10min;(6) 弃去上清液,加入100µl冰冷的0.1mo1/L CaCl2溶液,小心悬浮细胞,冰上放置片刻后,即制成了感受态细胞悬液;(7) 制备好的感受态细胞
的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞:处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子):带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞,用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态,然后与 pUC18质粒共保温,实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因,因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性,用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释,在含氨
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