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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
- 库存:
348
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)北京厂家用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)等生化检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)北京厂家
英文名:Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
规格:100次
编号:YT310
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化*(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。

基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化*的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化*,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化*酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化*的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化*时,对于检测结果仍无显著影响。
哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中,含量最高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中,并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD,extracellular SOD,简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD,和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高,但有所不同。综上所述,细胞或组织内共有两类SOD,即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的抑制剂抑制其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性,就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。
KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性,也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒,并且对Cu/Zn-SOD的抑制百分比达不到很接近100%。
本试剂盒采用了一种无毒的两步双重抑制Cu/Zn-SOD的方法,在避免使用有毒药品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的抑制百分比达到高度接近100%,即对于Cu/Zn-SOD的抑制效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
4. Cu/Zn-SOD抑制剂A对人体有刺激性,使用时请注意适当防护。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
想要了解更多关于Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)北京厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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·dGTP溶液(100mM)
编号:YT387
英文名称:dGTP Solution
规格:250μl
dGTP即2’-deoxyguanosine 5’-triphosphate,中文名为脱氧鸟苷三磷酸,常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
分子式:C10H13N5O13P3Na3
分子量:573.2(酸形式的分子量为507.2)
最大吸收波长:253nm。
本dGTP溶液用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM,即100mmol/L。
本dGTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本dGTP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
储存条件:-20℃。
·小鼠抗AU1标签抗体
编号:YT681
英文名称:AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:50μl
本品为来源于小鼠的抗AU1标签的单克隆抗体
宿主:小鼠
用途:WB,ELISA,IP,ICC, IF
推荐稀释比例:WB(1:1000)
克隆性:单克隆抗体
| About this Antibody | |
| Name | AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody |
| Category | Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody |
| Isotype | IgG2a |
| Purification | ProL affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide DTYRYI (KLH-coupled). |
| Gene ID | - |
| SwissProt | - |
| Synonyms | - |
| Category | Related Products |
| Background | The recognized AU1 sequence represents the amino acid sequence DTYRYI, derived from the major capsid protein of bovine papillomavirus-1 (BPV-1). AU1 is a commonly used epitope tag engineered onto the N- or C- terminus of a protein of interest so that the tagged protein can be analyzed and visualized by immunochemical methods. This antibody recognizes the AU1-tag fused to the carboxyl terminus of targeted proteins. |
注意事项:
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·PKC抑制剂(蛋白激酶C抑制剂)(Staurosporine)
编号:YT352
英文名称:Protein Kinase C Inhibitor
规格:0.1mg|0.5mg
本品是一种可以通透细胞膜的蛋白激酶C(PKC)抑制剂,IC50达到0.7nM。在浓度较高时(1-20nM),可以抑制CDK1/cyclin B,CDK2/cyclin A,CDK4/cyclin D,CDK/p25,GSK-3β,PKA、PKG和CAMKII等蛋白激酶;在50-100nM,可以促进神经突起的生长;在0.2-1μM,可以诱导细胞凋亡。Staurosporine还可以抑制肿瘤细胞中VEGF的上调。
CAS:62996-74-1
分子式:C28H26N4O3
分子量:466.53
纯度:>98%
储存条件:-20℃避光。
·STAT3凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT257
英文名称:STAT3 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT3 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-STAT3的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
STAT3 consensus oligo的序列如下:
5"-GAT CCT TCT GGG AAT TCC TAG ATC-3"
3"-CTA GGA AGA CCC TTA AGG ATC TAG-5"
EMSA突变探针-STAT3中STAT3的公认的结合位点发生了突变,从而使STAT3无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和STAT3的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和STAT3的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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