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- 2025年07月07日
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上海一基
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文献和实验一样，RNeasy Protect Kits采用硅胶膜纯化柱技术，迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA，经过洗涤除去各种杂质，不用酚氯仿抽提，不用乙醇沉淀或LiCl沉淀，也不用CsCl超离，只要洗脱即可得到纯的RNA，样品量根据样品量、所选的试剂盒型号可达100微克，或者1毫克，甚至6毫克。 通常情况下RNeasy的纯化技术足以除去绝大部分的DNA，而无需额外进行DNaes处理，但是对于一些对痕量DNA非常敏感的实验，用RNase-Free DNase Set（QIAGEN cat.no.79254
Protect Kits采用硅胶膜纯化柱技术，迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA，经过洗涤除去各种杂质，不用酚氯仿抽提，不用乙醇沉淀或LiCl沉淀，也不用CsCl超离，只要洗脱即可得到纯的RNA，样品量根据样品量、所选的试剂盒型号可达100微克，或者1毫克，甚至6毫克。 通常情况下RNeasy的纯化技术足以除去绝大部分的DNA，而无需额外进行DNaes处理，但是对于一些对痕量DNA非常敏感的实验，用RNase-Free DNase Set（QIAGEN cat.no.79254）可以直接在纯化
的RNA。由于RNA仅洗脱至14-30 µl，下游应用中的反应体积可更小 。 各种文献对于RNA纯化的经验总结： 1、获得样品后，尽快开始固定。 2、将样本切薄再浸泡 (如果能到 5mm 或更薄最好)。 3、避免过度固定，浸泡时间过长。 4、RNA 纯化要包括逆转胶联的步骤。QIAGEN的试剂盒中的步骤正满足这样的建议。 5、纯化的样品最好是固定或者包埋时间在半年内的样本。放置时间越长，对于RNA纯化越不利。 在后续逆转录反应中，使用随机
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