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文献和实验相关专题 细胞培养基的配制 Cambrex公司最近推出一款改良后新型的Poietics(TM)前脂肪细胞生长培养基试剂盒(Preadipocyte Growth Media Kit,PGM-2),此培养基用于培养人类前脂肪细胞用于肥胖、胰岛素抗性、II型糖尿病、验证和相关心血管疾病研究的。 Poietics的PGM-2培养基比起其它商业化的培养基能够在较短的时间内(十天)让细胞更好的增殖和分化。在培养细胞过程中不需要更换培养基
4.操作步骤 1)大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落,接种于3~5ml LB液体培养中,37℃振荡培养12h左右,直至对数生长期。将该菌悬液以1:100~1:50转接于100ml LB液体培养基中,37℃振荡扩大培养,当培养液开始出现混浊后,每隔20~30min测一次OD600nm,至OD600nm≤0.5时停止培养;(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中,在冰上冷却20-30min,于4℃,4000r/
活化&摇菌推荐流程 单克隆菌落分离:若是连接克隆新转化的平板,直接挑取单克隆菌落即可;若是冻存甘油菌种,需用接种环蘸取少量菌种,在含对应抗生素的LB固体培养基平板上划线活化,放入37℃培养箱倒置培养,直至长出清晰单菌落。 小体积摇菌:挑取长势良好的单菌落,接入3 ml含对应抗生素的LB液体培养基,37℃摇床200 rpm 培养6-8 h,完成菌种活化扩增。 大体积扩培:按照1:1000的比例
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