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miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销

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  • 2025年07月12日
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      miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销

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      上海一研

    miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销注意事项:
    1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
    2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
    3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
    miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销详细介绍:
    产品细节图片1
    miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销技术优势
    1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
    2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
    3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
    4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
    5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
    miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次直销操作步骤:
    1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
    c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
    3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
    6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
    7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
    8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
    9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
    10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
    trans-Resveratrol-d4 (100 ug)    5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol-2,3,5,6-d4; (E)-Resveratrol-d4; trans-Resveratrol-d4
    cis-trismethoxy Resveratrol (50 mg)    1,3-dimethoxy-5-[(1Z)-2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]-benzene; cis-Trimethoxy Stilbene; cis-trismethoxy Resveratrol
    Myristic Acid Alkyne (500 ug)    13-tetradecynoic acid; Click Tag
    Pifithrin-α (25 mg)    1-(4-methylphenyl)-2-(4,5,6,7-tetrahydro-2-imino-3(2H)-benzothiazolyl)-ethanone, monohydrobromide; PFT-α; Pifithrin-α
    2-amino Pyridyl-5-thioamide (250 mg)    6-amino-9-pyridinecarbothioamide; 2-amino Pyridyl-5-thioamide
    ACS 67 (10 mg)    7-[(1R,2R,3R,5S)-3,5-dihydroxy-2-[(3R)-3-hydroxy-5-phenylpentyl]cyclopentyl]-4-(3-thioxo-3H-1,2-dithiol-5-yl)phenyl ester, 5Z-heptenoic acid; ACS 67
    CAY10622 (5 mg)    3-[[[[[4-(aminocarbonyl)phenyl]amino]carbonyl]amino]methyl]-N-(1,2,3,4-tetrahydro-7-isoquinolinyl)-benzamide; CAY10622
    19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (500 ug)    9-oxo-11。alpha。,15S,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGE1; 19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
    11β-Prostaglandin E2 (500 ug)    9-oxo-11。beta。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11β-PGE2|11-epi PGE2; 11β-Prostaglandin E2
    13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α (1 mg)    9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGF1α; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
    5-trans U-46619 (10 mg)    9,11-dideoxy-9。alpha。,11。alpha。-methanoepoxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid; 5,6-trans U-46619; 5-trans U-46619
    15(S)-Fluprostenol (100 mg)    9α,11α,15S-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-Fluprostenol
    YM-53601 (5 mg)    2-[(2E)-2-(1-azabicyclo[2。2。2]oct-3-ylidene)-2-fluoroethoxy]-9H-carbazole, monohydrochloride; YM-53601
    Leukotriene B4 (500 ug)    5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; LTB4; Leukotriene B4
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    5(S),15(S)-DiHETE (50 ug)    5S,15S-dihydroxy-6E,8Z,10Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),15(S)-DiHETE
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    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等

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