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详见说明书
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cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格
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44
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上海一研
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格详细介绍:
cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
3Z)-N-(3-Chlorophenyl)-3-({3,5-dimethyl-4-[(4-methylperazin-1-yl)carbonyl]-1H-pyrrol-2-yl}methylene)-N-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonamide SU 11274
3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine; TMBHK TMB, High Kinetics
6-Fluoro-N-(4-fluorobenzyl)quinozaline-4-amine Spautin-1
5- Hyperforin. DCHA
[5-(1,1-Dioxo-thiomorpholin-4-ylmethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]-(tetrahydro-pyran-4-ylmethyl)-amine, dihydrochloride Necrosis Inhibitor, Necrox-5
2,4-Pyridinecarboxylic acid, monohydrate HDM Inhibitor, 2,4-PDCA
4-(4-amino-5-(7-methoxy-1H-indol-2-yl)imidazo[5,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)cyclohexanecarboxylic acid; ASP4786 OSI-027
1-Isopropyl-6-(6-(4-isopropylperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-N-((6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-1H-indazole-4-carboxamide UNC1999
N- KN-93
N-[4-[[[[Tetrahydro-4-(4-methoxyphenyl)-2H-pyran-4-yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]-2-furancarboxamide JW55
2-Bromo-N-[3-[(1-oxobutyl)amino]phenyl]benzamide ML161
Annexin V-EGFP Reagent Annexin V-EGFP Reagent
Heparin Sepharose Column Heparin Sepharose Column
5-(3-Methoxy-4-((4-methoxybenzyl)oxy)benzyl)pyrimidine-2,4-diamine EZSolution GW2580
Spautin-1 Spautin-1
DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 3.5 kDa
Leukotriene E4 Lipid Maps MS Standard (1 mg) LTE4, Leukotriene E4 Lipid Maps MS Standard, 5S-hydroxy-6R-(S-cysteinyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid
Simvastatin (10 mg) MK 733, Simvastatin, 2,2-dimethyl-1S,2,3R,7S,8S,8aR-hexahydro-3,7-dimethyl-8-[2-[(2R,4R)-tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl]ethyl]-1-naphthalenyl ester, butanoic acid人儿茶酚胺(CA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多药耐药相关(MRP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多形核白细胞弹性酶(PMN Elastase)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多效(PTN)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多肽YY(Peptide-YY)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多免疫球受体(poly-IgR)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多聚血清(PHSA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
cDNA 第一链合成试剂盒50 次价格人多聚ADP聚合酶(PARP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多巴色素异构酶(DT)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人脱羧酶(DDC)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人-β羟化酶(DBH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人D2受体(D2R)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人D1受体(D1R)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人(DA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人对氧磷酶ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人对(CTX)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人对氨基苯甲(PABA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
利用RACE [Rapid Amplification of cDNA ENDs,cDNA末端的快速扩增],可以很简单地得到mRNA的5'末端序列,然而5'RACE是一个很复杂的技术,它的成功依赖每一步反应的有效完成。cDNA第一链的合成是由一个反义的基因特异性引物(Gene-specific primer,GSP)来起始的,cDNA第一链纯化后,利用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)在cDNA的5'末端加上一个合成
dNTP量=[(0.4nmol/μl×100μl)-0.48nm]×1.18% =0.47nmol 合成第二链cDNA量(ng)=0.47nmol×330ng/nmol =155ng 双链cDNA转变率=155ng /158ng×100%=98% 一般cDNA第一链转变率和双链转变率以12-50%和50-200%为好。 (四) 电泳分析 通常合成的cDNA第一链和第二链长度为350-6000碱基,需进行1.4%碱性琼脂糖电泳。将第一链和第二链掺入测定管中的反应液先用酚抽提,乙醇
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