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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
1500 U/10000 U
| 规格: | 1500 U | 产品价格: | ¥760.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10000 U | 产品价格: | ¥3350.0 |
Klenow (3'-5' exo-) 是DNA Klenow Fragment的突变酶。该酶在模板和引物存在的条件下,以dNTP作底物,沿5'-3'方向催化与模板互补DNA的合成。通过点突变改造,使本酶同时失去了3'-5'外切核酸酶的活性和切刻平移活性。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶。分子量大小约为68.1 kDa。
产品特点
1. 通过点突变改造使得本酶的5'-3'聚合酶活性更强。
2. 酶比活性高,稳定性好,与其他酶兼容能力强。
应用范围
1. 在二代测序(NGS)应用中,主要用于文库构建过程中平端双链DNA片段的加“A”反应。
2. 双脱氧法DNA 序列测定(Sanger 法)。
单位定义
1单位活力定义为在37℃、30分钟内,将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。
酶蛋白性质描述
| 性质 | 蛋白描述 |
| 蛋白纯度 | >99% |
| 酶活性 | 10,000 U/mg |
| 单链外切酶活性 | 500 U酶中,<10.0% |
| 双链外切酶活性 | 500 U酶中,<10.0% |
| 双链内切酶活性 | 500 U酶中,未检出 |
| 宿主基因组污染 | 500 U酶中,<10个拷贝 |
| UDG酶活性 | <20 U/ml |
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文献和实验Buffer/tube and incubate 10' @ 70oC. 6. Add: 2.0ml 10X Klenow Mix +2.0ml 0.125mM dNTPs +0.5ml Klenow Incubate 10' @ 37℃. 7. Analyze 10ml on a gel. To the remainder in each tube, add 40ml Ligation Mix + 1ml T4 DNA Ligase. Incubate overnight @ 15℃
1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、RNA引物和四种dNTP的情况下,通过高温变性(90℃-95℃,1-2min),低温退火(25℃-37℃,1-2min),中温延伸(60℃-75℃,90sec-5min),这样反复循环的过程中,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1)、PCR反应成分: TaqDNA聚合酶引物浓度:一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50-200μ
的影响,所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍:使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80%的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II












