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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
10000 U
TIANSeq M-MLV是一种没有RNase H活性的RNA依赖的DNA聚合酶。可以催化以RNA或DNA-RNA杂交链为模板的互补DNA的聚合反应。本酶的RNase H结构域经过点突变分子改造,从而实现了该酶RNase H活性的缺失,这种分子改造不但使得本产品与M-MLV野生型相比具有更高的热稳定性,而且还提高了本产品的反转录效率和对长片段cDNA的反转录能力。
产品特点
酶活效率高:高效的逆转录酶活性,后续实验兼容性好。
底物范围广:适用于所有RNA,尤其是具有复杂二级结构的RNA模板。
反转片段长:cDNA第一链合成可以达12.3 kb。
适用范围
1.在二代测序(NGS)应用中,用于RNASeq文库构建过程中cDNA第一链的合成;
2.全长cDNA第一链合成
3. cDNA文库的构建;
4. 一步法RT-PCR;
5. RACE分析。
单位定义
1单位活力定义为在37℃,10分钟内,以polyr(A)/Oligo(dT)作为模板和引物,将1 nM
dTTP掺入到酸不溶物质所需的酶量。
酶蛋白性质描述
| 性质 | 蛋白描述 |
| 蛋白纯度 | >99% |
| 酶活性 | 20,000~28,880 U/mg |
| 单链核酸外切酶活性 | 2000 U酶中,<2.0% |
| 双链核酸外切酶活性 | 2000 U酶中,<1.0% |
| 双链核酸内切酶活性 | 2000 U酶中,未检出 |
| 宿主基因组污染 | 2000 U酶中,<10拷贝 |
| 非特异RNAse残留 | 2000 U酶中,未检出 |
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文献和实验1ml Protocol 1 1 (a) 1U RNase Inhibitor定义为能够抑制5ng RNase 50%活性的蛋白质量。避免反复冻融,使用时保持冰 浴。 (b) 1U M-MLV RT在37℃10分钟能将1nmol的脱氧
依赖于RNA合成DNA的酶。也称为RNA依赖性DNA聚合酶。是含于病毒——致癌RNA病毒(Retrovirus)粒子中的一种酶,以单链RNA为模板,合成具有与此相辅的核苷酸序列的DNA。是1970年由H.M.Temin等和D.Baltimore各自独立发现的。通过此酶首先从病毒RNA合成RNA-DNA杂化物,再从这杂化物合成双链DNA。仅分解 RNA- DNA杂化物RNA部分的核糖核酸酶H活性存在于此酶上。开始认为此酶仅存在于RNA病毒中,但后来由未感染病毒的细胞和正常组织中也分离出同样
RNase and DEPC Treatment: Fact or Laboratory Myth
. Figure 1. Effect of Autoclaving on RNase Activity. Various concentrations of RNase A were added to PBS and autoclaved for 25 minutes. 1 µl of each solution was mixed with 1 ng of a 5 x 104 cpm RNA probe which was 304 bases long and incubated












