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- 文献和实验
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- 规格:
24 rxn/96 rxn
| 规格: | 24 rxn | 产品价格: | ¥720.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96 rxn | 产品价格: | ¥2400.0 |
TIANSeq DNA片段化模块为高通量测序平台文库构建配套试剂盒,用于文库构建前的大片段DNA片段化。模块利用时间依赖型酶促反应的原理,根据不同的作用时间将双链DNA随机切割成200~500 bp的片段,所得片段为平末端双链DNA片段,5'端基团含有5'-P,3'端基团含有3'-OH,可直接进行后续的dA或adapter添加。通过TIANSeq DNA片段化模块对双链DNA随机的切割,表明本产品不具碱基偏好性,且不同类型切割DNA片段的测序覆盖率与机械切割一致。
产品特点
1. 无需特殊仪器设备,通过酶促反应简便快速的片段化双链DNA。
2. 使用灵活,通过调整片段化时间,灵活调整DNA片段化长度。
3. 反应高效,单个反应体系即可完成1 ng~1 μg DNA样本的片段化。
适用范围:为构建NGS文库制备片段化的双链DNA。
适用样本量:1 ng~1 μg DNA
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文献和实验322 EcoRⅠ-CIP 3μl(60ng) 2μl 14μl 1μl 20μl pBR322 EcoRⅠ 3μl(60ng) 2μl 14μl 1μl 20μl 加样顺序为ddH2O,10×T4缓冲液,DNA片段,最后加T4DNA连接酶(放于冰浴中)连接酶取好后应立即放回-20℃保存。 3.盖
1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、RNA引物和四种dNTP的情况下,通过高温变性(90℃-95℃,1-2min),低温退火(25℃-37℃,1-2min),中温延伸(60℃-75℃,90sec-5min),这样反复循环的过程中,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1)、PCR反应成分: TaqDNA聚合酶引物浓度:一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50-200μ
探针标记方法有:1、DNA的缺口平移法。缺口平移是一种快速、简便、成本相对较低以及生产高比活性均一标记DNA的方法。该技术可以制备序列特异的探针。当使用重组质粒探针时,虽然任何形式的双链DNA都可以进行缺口平移标记。但通常使用限制性核酸内切酶将插入片段进行酶切和凝胶电泳纯化后再进行缺口平移标记。此外,用这种探针进行杂交可产生较低的背景信号。2、DNA的随机引物法。这种方法是使用寡核苷酸引物和大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段来标记DNA片段。这种方法可代替缺口平移产生均一的标记探针外
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