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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
一站式全血 mRNAout25 次售后服务
- 库存:
41
- 供应商:
上海一研
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
一站式全血 mRNAout25 次售后服务技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
一站式全血 mRNAout25 次售后服务注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
一站式全血 mRNAout25 次售后服务详细介绍:
一站式全血 mRNAout25 次售后服务操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
优降糖相关物质A标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 16673-34-0 进口、国产
优降糖相关物质B标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 21165-77-5 进口、国产
甘油标准品 英文名称 Glycerin 规格: 2ml CAS: 56-81-5 进口、国产
甘油山崳酸酯标准品 英文名称 Glyceryl Behenate 规格: 200mg CAS: 18641-57-1 进口、国产
甘油二硬脂酸酯标准品 英文名称 Glyceryl Distearate 规格: 500mg CAS: 1323-83-7 进口、国产
甘油单亚油酸酯标准品 英文名称 Glyceryl Monolinoleate 规格: 500mg CAS: 26545-74-4 进口、国产
甘油单油酸酯90%标准品 英文名称 Glyceryl Monooleate 90% 规格: 250mg CAS: 25496-72-4 进口、国产
甘油单油酸酯40%标准品 英文名称 Glyceryl Monooleate 40% 规格: 500mg CAS: 25496-72-4 进口、国产
甘氨酸标准品 英文名称 Glycine 规格: 200mg CAS: 56-40-6 进口、国产
黄豆黄素标准品 英文名称 Glycitein 规格: 15mg CAS: 40957-83-3 进口、国产
黄豆黄甙标准品 英文名称 Glycitin 规格: 15mg CAS: 40246-10-4 进口、国产
甘草酸标准品 英文名称 Glycyrrhizic Acid 规格: 25mg CAS: 1405-86-3 进口、国产
甘罗溴铵甘罗溴铵标准品 英文名称 Glycopyrrolate 规格: 200mg CAS: 596-51-0 进口、国产
甘罗溴铵红霉素同分异构体标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 进口、国产
甘罗溴铵相关物质A标准品 英文名称 规格: 50mg CAS: 进口、国产
甘罗溴铵相关物质B标准品 英文名称 规格: 75mg CAS: 13118-11-1 进口、国产
甘罗溴铵相关物质C标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 进口、国产
醋酸戈那瑞林标准品 英文名称 Gonadorelin Acetate 规格: 50mg CAS: 52699-48-6 进口、国产
醋酸戈那瑞林杂质标准品 英文名称 规格: 10mg CAS: NA 进口、国产phospho-TIRAP(Tyr86) 磷酸化白细胞介素1受体衔接蛋白抗体 0.1ml NUMB 膜相关蛋白Numb抗体 0.2ml
GPR65 G蛋白偶联受体65抗体 0.2ml Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体 0.1ml
RCC2 染色体浓缩调节蛋白2抗体 0.2ml Phospho-PDGFRA(Tyr1018) 磷酸化血小板源性生长因子受体-α抗体 0.1ml
MRP8+MRP14 多药耐药相关蛋白8/9/14抗体 0.2ml PLAP/Phospholipase A2 activator protein 磷脂酶A2激活蛋白抗体 0.1ml
CA6 碳酸酐酶6抗体 0.2ml Rab27a RAM-11抗体 0.2ml
CCDC60 卷曲螺旋结构域蛋白60抗体 0.2ml RAR gamma/Retinoic Acid Receptor gamma 维甲酸受体γ抗体 0.2ml
phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌决定因子Myf5抗体 0.1ml SPINK1/SPINK3 肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂1抗体 0.2ml
一站式全血 mRNAout25 次售后服务PRDX2/Peroxiredoxin-SO3 硫氧还蛋白过氧化物酶2 0.2ml Smad3 细胞信号转导分子SMAD3抗体 0.1ml
GLB1L3 β半乳糖苷酶1样蛋白3抗体 0.2ml Stanniocalcin 1 斯钙素抗体 0.1ml
GOLPH2/GP73 高尔基体膜蛋白GP73抗体 0.2ml TGF beta 3 propeptide 转移生长因子β3抗体 0.1ml
Annexin VI 膜粘连蛋白6抗体 0.1ml Trk C 酪氨酸激酶C抗体(神经生长因子受体的一种) 0.1ml
ARSK 芳香基硫酸酯酶K抗体 0.2ml Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) 磷酸化内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体 0.1ml
Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制剂D抗体 0.2ml Goat anti-Bovine IgG whole serum 羊抗牛IgG抗血清 1ml
MARCH6 膜相关环指蛋白6抗体 0.2ml Dog IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml
GPBB/PYGB 脑糖原磷酸化酶抗体 0.2ml Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
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文献和实验2.3 中准备好的 Fab-Strep,让其自动往下流(孵育时间是足够 2 分钟的); 1.9 加入2 ml Buffer CI洗柱子。更换下面接废液的离心管,至此柱子就准备好了; 1.10 将前面稀释好的血液加入柱子中,一次最多加入 5 ml(为了提高得率,可通过使用 restrictor 来降低流速),并收集血液。每根柱子能承受的全血量请参考对应的说明书 1.11 过完全血后,用 4×10 ml 的 Buffer CI 洗 4 次柱子; 1.12 更换下面接液流的离心管,收集目的细胞。加入
到 Quadrow 上(下图 B)。b) 以 8 ml Buffer CI 清洗并平衡重力柱。c) 加入 1 ml 制备好的 Fab-Strep,在 Fab-Strep 完全进入填料后,孵育 2 mind) 以 2 ml Buffer CI 清洗重力柱即完成。(3) 细胞分选a) 上样 : 将稀释后的全血分梯次加入,每次最多 10 ml。收集流过的样本,里面包含未被标记的细胞。b) 清洗 : 以 10 ml Buffer CI 洗涤重力柱 4 次,收集流出的溶液,是为阴性组分。清洗后填料应转为白色。c) 洗脱
0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 5-10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。6. 较精确估计裂解物体积,加入等体积的70%乙醇(请先检查是否已加入无水乙醇!),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。7. 立刻将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm离心60秒,弃掉废液。8. 加700μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃
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