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- Js12042-100ug
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 保质期：
见产品包装
- 英文名：
SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins
- 库存：
大量现货
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100ug
SDS-聚丙*烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）次高分子量标准蛋白质
本试剂为测定未知蛋白质分子量的标准参照样品，分子量范围为 43,000-200,000 道尔顿，特别适用于
测定分子量在 100,000-200,000 道尔顿的蛋白质。
规格
内容：冷冻干燥的五种蛋白质混合物，每种蛋白质约 20 微克。用本试剂按 Laemmli 法，经 SDS-聚丙*烯酰胺凝胶电泳后用考马斯亮蓝R-250 (Coomassie Blue R-250) 染色可得分布均匀、密度相同的五个条带。组成：肌球蛋白重链（200,000 道尔顿），钙调素结合蛋白（130,000 道尔顿）兔磷酸化酶 B（97,400 道尔顿）， 牛血清白蛋白（66,200 道尔顿）兔肌动蛋白 （43,000 道尔顿）。
储藏： -20℃。
使用次数：用考马斯亮蓝 R-250 染色每管可用约 20 次。建议使用分离胶浓度：7％
使用方法
开封后溶于 100 微升重蒸水，再加入等体积的 2 倍样品缓冲液（100 微升）,于沸水浴中加热 5 分钟后，分装于小管内置-20℃保存。使用前置室温融化后，沸水浴中加热 3 分钟，乘热上样。
图 1. 次高分子量标准蛋白按Laemmli 法经7%SDS-聚丙烯*酰胺凝胶电泳后用考马斯亮蓝R-250 染色。
图 2. 用次高分子量标准蛋白质所作的标准曲线。
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文献和实验SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）
⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器（10μl或50μl） ⑧水泵或油泵 ⑨真空干燥器 ⑩培养皿（直径120mm） 2．试剂： （1）标准蛋白质 目前国内外均有厂商生产低分子量及高分子量标准蛋白质成套试剂盒，用于SDS-PAGE测定未知蛋白质分子量。 ①高分子量标准蛋白试剂盒（Pharmacia公司产品，表中16-1）。 表16-1 5种标准蛋白质 同时按说明书要求处理 ②
2～4 h，使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连； 免疫沉淀反应后，在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3～4 次；最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液，沸水煮 5 分钟； SDS-PAGE，Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
过程恒压的方式，通常把电压设置在100V，然后设定定时时间为90-120分钟。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。 通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。 3. 转膜(Transfer)： (1)膜的选择：推荐在Western实验中选用PVDF膜。 硝酸纤维素膜(NC膜)也可以使用，但硝酸纤维素膜比较水浴加热3-5分钟，以充脆，在操作过程中特别是用镊子夹取
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