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- 详细信息
- 技术资料
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-20℃
- 保质期:
至少12个月
- 英文名:
Annealing Buffer for DNA Oligos,5×
- 库存:
519
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京DNA退火缓冲液(5X)厂家价格,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:北京DNA退火缓冲液(5X)厂家价格
产地:国产|进口
英文名:Annealing Buffer for DNA Oligos,5×
编号:QN1032
品牌:百奥莱博
DNA退火缓冲液即DNA寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA Oligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNA Oligo的退火。使用DNA退火缓冲液(5×)可以有效避免DNA Oligo自身形成发夹结构,并且两条Oligo退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的DNA Oligo和DNA退火缓冲液(5×)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。
储存条件:-20℃,有效期至少12个月。
北京DNA退火缓冲液(5X)厂家价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·聚乙二醇 PEG 4000
编号:QN0712
英文名称:Poly(ethylene glycol)4000
规格:500g|1kg|5kg
别名:聚氧乙*(代"烯")4000;PEG4000
CAS号:25322-68-3
分子式:HO(C2H4O)nH
分子量:3500-4500
性状:白色或浅黄色坚硬蜡状固体或颗粒状
储存条件:室温
·γ-*基丁酸
编号:QN0300
英文名称:γ-aminobutyric acid
规格:5g
本品仅用作科研性质的实验试剂。γ-*基丁酸可降低血*,促进大脑新陈代谢。用于治疗各种类型的肝昏迷,亦用于脑卒后遗症、脑动脉硬化症、头部外伤后遗症及尿毒症、煤气中毒等所致的昏迷。
别名:4-*基丁酸
英文名称:γ-aminobutyric acid
CAS号:56-12-2
分子式:C4H9NO2
分子量:103.12
性状:白色片状或针状结晶
·D-阿拉伯糖
编号:QN0192
英文名称:D-(-)Arabinose
规格:10g
别名:D(-)-树胶醛糖;D(-)-阿戊糖
CAS号:10323-20-3
分子式:C5H10O5
分子量:150.13
储存条件:室温干燥保存
纯度:≥98%
性状:白色结晶
溶解性:溶于水,参考浓度200mg/4ml
·Acyl-CoA Oxidase 酯酰辅酶A氧化酶
编号:QN0378
英文名称:Acyl-CoA Oxidase/ Acyl-CoA:oxygen-2-oxidoreductase
规格:500U
CAS号:61116-22-1
储存条件:-20℃
性状:黄色冻干粉
来源:微生物
比活:≥ 30U/mg protein
分子量:78 kDa (SDS-PAGE)
等电点:6.7
米氏常数:10-5(Palmitoyl-CoA)
最适pH:8.5
最适温度:37~40℃
pH 稳定性:6.0-8.5 (25℃, 15hr)
温度稳定性:< 45℃(pH 7.5, 15min)
抑制剂:Ag+,Hg2+
储存条件:-20℃
活性定义:在pH7.5,温度为37℃的条件下,1unit每分钟可催化生成1μmol的H2O2。
北京DNA退火缓冲液(5X)厂家价格关键词:Annealing Buffer for DNA Oligos,5×,QN1032,5X,DNA退火缓冲液(5X)
·嘌呤霉素
编号:QN0078
英文名称:Puromycin
规格:25mg|100mg
本品是蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。
CAS:58-58-2
分子式:C22H29N7O5·2HCl
分子量:544.43
储存条件:-20℃
纯度:≥98%(TLC)
性状:白色或白中带有黄色的粉末
别名:二盐*(代"酸")嘌呤霉素;嘌呤霉素盐*(代"酸")盐
溶解性:溶于水,参考浓度50mg/ml。
嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌,各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是*酰-tRNA分子3’末端的类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后,不会参与随后的任何反应,从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC),赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关,现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下,嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。
使用方法:
1.建议使用浓度
哺乳动物细胞:1-10 μg/mL,最佳浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌:LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌,使用浓度为125μg/mL。注:使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节,而且受宿主细胞本身的影响。
2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液,经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存;也可溶于甲醇,配制成10 mg/ml的储存液。
3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株,确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1:24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板,铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2:
a)准备筛选培养基:含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL,至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4:更换新鲜的筛选培养基,并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态,约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞,观察存活细胞率,从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。
4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后,细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖,以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后,将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意:当细胞处于分裂活跃期时,抗生素作用最明显。细胞过于密集,抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天,移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间,这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意:每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h,有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中,用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物,操作时请小心拿放。
北京DNA退火缓冲液(5X)厂家价格关键词:Annealing Buffer for DNA Oligos,5×,QN1032,5X,DNA退火缓冲液(5X)
BL0900 FITC标记羊抗大鼠IgG抗体
S-羧甲基-L-半胱*酸 Middle range protein MW marker 638-23-3
58-96-8 Uridine 尿苷
环辛酮 Fmoc-Pro-OH 502-49-8
聚醚醇 DL- Asparaning H2O 3055-99-0
ARB12381 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)血清中含量检测 Rat associated protein a,sp-a ELISA KIT
ARB11433 人热休克蛋白72(HSP-72)ELISA检测服务 Human heat shock protein 70,hsp-70 ELISA KIT
磷酸转乙酰化酶 Stevioside 9029-91-8
ARB10691 人肌*蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa分析 Human troponin Ⅰ,tn-Ⅰ ELISA KIT
KP202 Fast HiFidelity PCR Kit
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ARB12007 大鼠SmAd7 免费代测 Rat mothers against decapentaplegic homolog 7,smad7 ELISA KIT
花宝2号 α-Amylase(Bacilus subtilis)
葡萄糖酸锌 1,1-Dimethylbiguanide hydrochloride (Metformin) 4468-02-4
SRP01 兔脑磷脂 10g
NF-202 羊抗人APO-B血清
新霉素硫*(代"酸")盐 Azoviolet 1405-10-3
ARB10110 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)血清中含量检测 Human ice protease-activating factor,irap ELISA KIT
ARB11062 人转化生长因子β2(TGF-β2)Elisa分析 Human transforming growth factors β2,tgfβ2 ELISA KIT
ARB14214 鹅白细胞介素2(IL-2)含量分析
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