- ￥1500
- 华拓生物
- 中国/进口
- HTX2491C
- 2025年12月23日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
melan-a
- 库存：
现货库存
- 供应商：
lonza
- 肿瘤类型：
见细胞说明
- 细胞类型：
科研细胞
- 品系：
melan-a鼠黑色素瘤细胞
- 组织来源：
鼠黑色素瘤细胞
- 相关疾病：
请联系我们发送详细说明书
- 物种来源：
小鼠
- 免疫类型：
见细胞资料
- 细胞形态：
请联系我们发送详细资料
- 是否是肿瘤细胞：
见细胞类型说明
- 器官来源：
鼠黑色素瘤细胞
- 运输方式：
常温或干冰冻存发货，空运快递
- 年限：
代数：三代内
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
2X10^6 cells
| 细胞名称： | melan-a鼠黑色素瘤细胞 |
| 组织来源： | 黑色素细胞，自发永生，C57BL/6，鼠黑色素瘤细胞 |
| 培养基： | 89%1640+10%FBS+1%双抗 |
华拓生物科技有限公司（www.otwobiotech.com）技术咨询方式： 微信：13265824656 或 QQ：1245980541
melan-a细胞产品介绍：
发货方式：
复苏后发货：我们复苏细胞后发货，货期一周左右，免运费。（气温较好建议复苏后发货）
冻存发货(干冰运输）：需额外增加干冰运费，选择干冰运输的我们发两管细胞，为了保证客户接种可靠性多发一管。（气温低于0℃须冻存发货）
细胞发货采取专业的运输包装，并选择最快捷的运输方式（顺丰速运或其他空运快递）
本公司细胞引种来源：ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等
细胞处理方法：
一、贴壁细胞
1、 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。
4、37度平衡1-2小时。
5、用移液管吸取培养基，到50ml离心管中，剩下细胞密度达到80%至90%可以传代，如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。
6、如果肉眼检查上清有细胞，对50ml上清进行离心收集细胞，如果细胞连片状态，弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化（1ml胰酶37度），接种培养。
二、悬浮细胞
1、接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。
4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。
5、1000rpm，5min 离心，用吸管小心吸出上清，加入培养基，重悬细胞。
6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种，加入新鲜培养基，置于 37℃，5%CO2 培养（大部分细胞）。
melan-a细胞培养操作：华拓细胞培养操作指南
细胞常见问题分析：细胞培养常见问题分析
细胞在发货前进行质检：
1、细胞存种的活性检测
2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检
3、衣原体、支原体检测（荧光法、培养法等）
产品质量保证及售后：
1、 细胞为三代以内，活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好，我们完全免费重新发货。
2、 实验过程中若确定是客户问题，客户仅需支付物流和耗材费用，我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、 产品使用过程中，华拓生物可提供技术上的指导。
melan-a细胞培养常见注意事项：
1、收货时，如不能在收到细胞后及时操作处理细胞，T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，需即刻复苏细胞；T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上，再开始处理细胞，平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、贴壁细胞在消化时，因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样，不能完全规定消化时间，以科研人员经验为准。 对于消化这步，如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议可以按照下述操作：胰酶首先复温到室温后加入细胞，然后每隔30秒，即吹打下细胞，如果能够吹打散细胞，加入完全培养基终止消化，把细胞打散后，离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。注意消化时间，不要过度，细胞变圆可以吹下来即可终止。
3、传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代；传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险；细胞状态不好或者生长比较慢时，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度；细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效改善；建议不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化，也可以联系咨询我们。
4、melan-a细胞冻存时，部分长得比较慢的细胞，冻存的细胞密度要稍微大点，以防止复苏后生长困难；冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO，同时浓度不要太高，部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡，所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度；冻存时建议设置冻存检测，即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中，与正常体积冻存的细胞共同冻存，至液氮后复苏检查冻存结果，冻检合格前，留一部分细胞继续培养，以防万一；细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则，即冻存时温度不能急剧下降，应控制温度缓慢下降，复苏时应快速融化，融化后尽快加入培养基中。
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文献和实验B16鼠黑色素瘤细胞。好像这株细胞还有亚型的，不过中科院说不清，我也就说不清了。总之是B16。细胞总的来说比较好养，操作基本都是常规的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培养，一段时间为了省钱用过新生牛也不错。但是传代多了，细胞有形态改变。可以弃掉重新复苏。血清国产的杭州四季青，感觉不灭活比灭活要好养一些。传代操作，主要是无菌操作。细胞增殖快非常好养，但是及时换液，否则也很容易死亡、或变形。消化用胰酶0.25%，可以用含EDTA的，效率更高一点。消化步骤：弃血清——用D-hank's
了基础。 (2)用于过继性肿瘤免疫治疗：Mei-denbauer等将大量Melan-A肽特异性CTL(42．1％)，静脉输注给8例难治性恶性黑色素瘤患者，结果发现外周血单核细胞中抗原特异性CTL的比率由输注的o．01％～0．07％升至输注后的2％。而且这些细胞能在活体内存活数周，具有分泌INF-7功能，并优先聚集到肿瘤局部发挥作用。 (3)用于疫苗疗效的监测：近年用抗原肽脉冲处理的扰作为疫苗免疫机体从而诱发有效的CTL反应成为研究热点。可用同源
来源、不同分化阶段的细胞可表达不同的分化抗原。利用人黑色素瘤特异的CTL克隆已鉴定出多种黑色素细胞分化抗原，这些抗原在多种黑色素瘤细胞呈异常表达，但在正常黑色素细胞仅呈轻微表达。现已发现的Pmel17 gpl00、酪氨酸酶和Melan-AMART-1 等分化抗原在黑色素瘤细胞中呈高表达，而且不同患者的黑色素瘤的分化抗原的结构高度同源，即很少显示个体差异，其机制可能涉及黑色素瘤细胞在生长发育的特定阶段，发生基因的异常性激活或调节基因发生突变，引起编码蛋白异常表达和细胞恶性转化。这些异常表达的分化
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