DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 细胞生物学试剂

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名称：DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 细胞生物学试剂
品牌：百奥莱博
英文名：DEAE-Dextran Transfection Kit
规格：>200次
产地：国产|进口
编号：YT181
本试剂盒是一种适合于把DNA转染到培养的真核细胞中的转染试剂盒。对于六孔板而言，一个包装的本转染试剂如使用常规方法可以转染2500个孔，如使用预处理方法可以转染200个孔。

试剂盒组分：
DEAE-Dextran溶液————20ml
10×PBS—————————20ml
*喹溶液————————3.5ml

关于DEAE-dextran的细胞转染方法早在1968年就有相关论文发表。DEAE-dextran可以促使DNA结合到细胞膜上，然后通过内吞作用(endo*(代"c")ytosis)进入细胞。基于DEAE-dextran的细胞转染方法适用于瞬时转染(transient tranfection)，但不适用于筛选稳定表达细胞株。DEAE-dextran在较高浓度作用较长时间会对细胞产生一定毒性。

目前基于DEAE-dextran的细胞转染方法有两种，一种方法为把DNA和DEAE-dextran混合后加入到细胞中，另一种方法为先用DEAE-dextran预处理细胞，然后再加入DNA。后一种方法是在前一种方法的基础上经过改进而产生的，对于一些细胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB细胞等，后一种方法可以增加细胞对DNA的摄入量，显著改善转染效果。*喹的加入可以抑制溶酶体对外源DNA的降解，从而提高转染效率。但对于具体的细胞、具体的培养条件，如需获得更加理想的转染效率，必须自行摸索上述各种转染方法，找出优化的转染方法。

基于DEAE-dextran的细胞转染方法不仅可以转染贴壁细胞，也可以转染悬浮细胞。转染效率可以通过转染表达EGFP或其它荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。

注意事项：
1. 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒，可以使用百奥莱博的质粒大量抽提试剂盒(YT003)进行抽提，以保证获得较高的转染效率。
2. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
3. 试剂盒中各试剂均经过无菌处理，可以直接使用。在细胞转染过程中要严格注意无菌操作。
4. 需自备用于洗涤的PBS或HBSS，以及用于稀释10XPBS的无菌水。
5. 稀释或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用试剂盒中提供的10XPBS稀释。
6. *喹溶液对人体有害，请注意适当防护。

储存条件：4℃，有效期1年。


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·蛋白G琼脂糖
编号：YT882
英文名称：Protein G Agarose
规格：2ml
本品主要用于免疫沉淀或免疫共沉淀，也可以用于抗体的纯化。

Protein G Agarose适合于免疫沉淀mouse IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit and goat polyclonal Abs, 以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。

Protein G共价交联到4% agarose beads上，2ml Protein G Agarose中共含有约2mg重组的Protein G。2 ml Protein G Agarose共可以结合约11mg human IgG。

Protein G Agarose配制在TBS溶液中，2ml中共含有0.5ml Agarose beads。

本Protein G Agarose如果用于常规的免疫沉淀，可以免疫沉淀100次。

注意事项：
1. 请勿冷冻保存本产品。
2. Protein G Agarose使用前一定要充分重悬，即充分颠倒若干次使混合均匀。
3. 从蛋白样品收集开始，所有步骤中蛋白样品都必须在4℃或冰上操作。

储存条件：4℃，有效期一年。

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