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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃冻存
- 保质期:
长期
- 库存:
625
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括HRP-羊抗兔IgG批发在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:HRP-羊抗兔IgG批发
编号:XH090
产地:国产|进口
规格:100ul/1ml
品牌:百奥莱博
辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔IgG是将辣根过氧化物酶(HRP,来源于SIGMA),经过碘酸*氧化而标记在抗体羊抗兔IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,而制成HRP-羊抗兔IgG。
储存条件:-20℃冻存。
浓度:抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围:HRP-羊抗兔IgG主要用于一抗来源于兔多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化,Western blotting,ELISA等实验。
主要性能:
免疫组化:1:20~50,DAB显色
免疫印迹法:1:100~400,DAB显色,1:1000~5000,ECL发光显色
ELISA法:1:500~2000(最高可达一万),用TMB显色
我公司的HRP-羊抗兔IgG批发,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·BCA蛋白浓度测定试剂盒
编号:XH062
规格:500微孔
本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔,如果是1ml比色皿时可做100孔。
产品简介
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
使用说明
一,微孔酶标仪法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二,分光光度计法、
如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下:
1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2, 稀释标准品:取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。
3, 取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。
4, 37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
HRP-羊抗兔IgG批发关键词:百奥莱博,HRP-羊抗兔IgG,XH090
·核酸助沉剂(Acryl Carrier)
编号:XH037
规格:1ml/10ml
主要性能介绍:
乙醇低温沉淀是回收液体样品中的DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀至少会丢失样品中核酸的30%左右。如果液体样品中的核酸浓度很低或DNA<200bp,乙醇沉淀只能回收50%的DNA和RNA。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)是一种分子生物学级Acryl多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入其5-10μl即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到98~100%,同时可选择性去除短引物片段和dNTP。
本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)已成为最常用的核酸助沉剂。
应该方面:
(1) 提高DNA或RNA沉淀的得率。例如,提高质粒产量,提高RNA提取得率等
(2) 痕量DNA或RNA回收。
(3) 沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。
使用方法:
(1) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml DNA或RNA溶液,继续进行所选择的核酸沉淀操作。
(2) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml TRIpure提取试剂,继续进行RNA提取操作。
(3) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)r到1 ml 质粒提取液,继续进行质粒提取操作。
储存: 4℃,有效期24个月。
·真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)
编号:XH007
规格:50T/200T
原理简介
真菌是具有真核和细胞壁的异养生物。种属很多,已报道的属达1万以上,种超过10万个。真菌通常又分为三类,即酵母菌、霉菌和蕈菌(大型真菌)。对于酵母菌和霉菌,可以用玻璃珠处理,而对于大型真菌,可直接用液液氮研磨。经过前期处理的菌液,再经过裂解液及蛋白酶处理后,玻璃奶吸附DNA,去掉其他杂质,,可得到高纯度的基因组。提取纯化后的DNA,可以直接用于 PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.由于真菌种类万千,对于一些特别难处理的真菌,可用液氮研磨,再用玻璃珠振荡,蛋白酶K处理,一般都可以得到一定量的基因组DNA,如电泳检测很弱,一般PCR都会有较好结果。
2.如果DNA提取量很少,可加长玻璃珠处理时间,如果提取DNA片段很短,成弥散条带,可减少玻璃珠处理时间。
操作步骤
1.样品的处理:
1)对于酵母菌,取1-2ml培养好的菌液,离心收集,弃上清。加入300ul 裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5-10min。
2)霉素(孢子也可相同处理):取50-100mg菌丝,加300ul裂解液,用玻璃研磨器适当研磨分散菌丝,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约30min。
3)大型真菌(如蘑菇等):称取50-100mg样品,倒入适量的液氮,立即研磨重复3 次,使样品研成粉末(如无液氮,可加300ul裂解液后用玻璃研磨器适当研磨),加300ul裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5min。
2.加入10ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,55℃水浴消化,15-30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次。
3.12000转离心2min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀,可再次离心。
4.在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,55℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
HRP-羊抗兔IgG批发关键词:百奥莱博,HRP-羊抗兔IgG,XH090
·HRP-羊抗人IgG
编号:XH098
规格:100ul/1ml
根过氧化物酶(HRP)标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG是将辣根过氧化物酶(HRP,来源于SIGMA),经过碘酸*氧化而标记在抗体羊抗人IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,而制成HRP-羊抗人IgG。
储存条件:-20℃冻存。
浓度:抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围:HRP-羊抗人IgG主要用于一抗来源于人多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化,Western blotting,ELISA等实验。
主要性能:
免疫组化:1:20~50,DAB显色
免疫印迹法:1:100~400,DAB显色,1:1000~5000,ECL发光显色
ELISA法:1:500~2000(最高可达一万),用TMB显色
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注:以下方法是一个
一、材料和方法1.试剂及耗材蛋白抽提试剂(改进型RIPA配方)BCA蛋白定量试剂盒5×还原样品缓冲液10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液10×TBST pH8.0湿转缓冲液PVDF膜,0.22um孔径丽春红染色液PMSF蛋白酶抑制剂封闭液ECL发光液山羊抗兔IgG(H+L),HRP兔抗山羊IgG(H+L),HRPβ-actin 鼠单抗2.实验仪器Fresco低温冷冻离心机MultiSkan3酶标仪电泳槽湿转电泳槽电泳仪水平脱色摇床 二、 实验方法及结果3.1细胞
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