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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
59
- 供应商:
上海谷研
- 检测范围:
仅用于科研实验,禁用于临床
- 检测方法:
采用双抗夹心法
- 应用:
详见说明书
- 适应物种:
小鼠,大鼠,猪,狗,猴,兔,羊,鸡,牛,鸭子,鱼,植物,昆虫等
- 标记物:
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
- 样本:
human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit
- 规格:
48T/96T
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)elisa定量检测试剂盒免费代测 | human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit | 48T/96T |
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或 者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上 清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)elisa定量检测试剂盒免费代测操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)elisa定量检测试剂盒免费代测技术原理:
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
温馨提示:使用前,请彻底阅读说明书。本酶联免疫试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
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文献和实验功能障碍。这种急性危重疾病发病机制仍然很大程度上未知。 在秀丽隐杆线虫中,热应激通过钙网蛋白和蛋白酶钙蛋白酶导致普遍的坏死细胞死亡——这些蛋白质的消耗限制了热应激引起的这些线虫的致死率。在脊椎动物中,程序性细胞坏死是由混合谱系激酶域样 (MLKL) 或 gasdermin 家族蛋白(例如 gasdermin D)介导的,它们在激活时会在细胞质或细胞内膜上形成孔。 热应激触发 RIPK3 依赖性细胞死亡(图源自 Science ) MLKL 被受体相互作用蛋白激酶 3 (RIPK3) 依赖
Nature 背靠背 | 浙大周青/John Silke 团队揭示关键蛋白激酶调控自体免疫疾病的分子机制
自体免疫疾病(autoimmune disease)是一类由免疫系统的异常激活引起的疾病。在这种情况下,过度激活的免疫细胞丧失了辨别「自己」与「非己」的能力,从而对自身组织器官展开攻击,并引起发烧和炎症反应。严重情况下,自身免疫反应会对身体重要器官造成不可逆的影响。针对介导自体免疫疾病发生的分子机制,科学家们长期以来在不断努力探索。近日,Nature 杂志在线刊登了两篇重磅级文章,同时揭示了关键蛋白激酶 RIPK1 的突变以及酶活性的改变对炎症反应以及自体免疫疾病发生的影响。文章
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