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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
- 库存:
869
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格:50次|200次
编号:WE0175
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血,最高得率可达30μg,可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer RCL | 125ml | 2×260ml |
| Buffer GR | 15ml | 50ml |
| Buffer GL | 15ml | 50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 12.5 mg | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱 DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大:可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强:适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤:
1、样品处理:
1.1、提取200 ul血液样品时,向离心管(自备)中加入样本后,可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时,加入Buffer GR补足至200μl,再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时,加入1~2.5倍体积的Buffer RCL,轻轻涡旋或颠倒混匀,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,小心吸弃上清液,如果沉淀中还有红色,可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR,震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血,其红细胞为有核细胞,血液样本量为5-20μl,可加入Buffer GR,补足至200μl后进行后续实验。
注意:如果下游试验对RNA敏感,可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液,震荡15秒,室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入200μl Buffer GL,震荡至彻底混匀。
注意:不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇,颠倒混匀数次。短暂离心,使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组,建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度,可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
更多有关柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·游离DNA样本保存管(10ml)
编号:WE0398
英文名称:Cell-Free DNA Storage Tube(10ml)
规格:5ml×5支|5ml×50支
游离DNA保存管可直接用于血样的采集与运输,并稳定其中的游离DNA(Cell-Free DNA),是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成,能够有效抑制血浆中的核酸酶,并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。
游离DNA保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行游离DNA提取,提取后的游离DNA可应用于下游的检测与分析。同时,该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。
·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
编号:WE0240
英文名称:NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Set II)
规格:24次|96次
本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer,专为illumina平台建库设计,index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要,制备的文库可用于Illumina GAIIx,HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 24次 | 96次 |
| Adaptor for Illumina | 60μl | 240μl |
| Universal Primer for Illumina | 30μl | 120μl |
| Index 13 -27 Primers for Illumina | 12×10 μ l | 12×20 μ l |
自备仪器、试剂和耗材
1、磁力架:建议使用DynaMagTM-2(货号: 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒:建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号: WE0205)。
3、DNA建库试剂盒:建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号: WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管:建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管;枪头:建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、Adaptor为双链结构,请勿将其置于室温温度以上,以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心,使液体收集到管底,以免不同引物间交叉污染。
使用流程

操作步骤:
百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。
Adaptor for Illumina:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina:
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 13–27 Primers for Illumina:
| Index Primers for Illumina | Index | |
| Index 13 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGTTGACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
AGTCAA |
| Index 14 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACGGAACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
AGTTCC |
| Index 15 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCTGACATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATGTCA |
| Index 16 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGGACGGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CCGTCC |
| Index 18 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTGCGGACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTCCGC |
| Index 19 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTTTCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTGAAA |
| Index 20 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGGCCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTGGCC |
| Index 21 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCCGAAACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTTTCG |
| Index 22 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACGTACGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CGTACG |
| Index 23 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATCCACTCGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GAGTGG |
| Index 25 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATATCAGTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACTGAT |
| Index 27 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAAGGAATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATTCCT |
储存条件:-20℃
柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家关键词:柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒,柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml),WE0175,Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
·Rosetta(DE3)感受态细胞
编号:WE0250
英文名称:Rosetta(DE3)Competent Cell
规格:100μl×10支
本产品是采用进口Rosetta菌株,经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌,补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)对应的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107。
产品组成:
| 组份 | 0.1ml×10支 |
| Rosetta(DE3)Competent Cell | 10×100μl |
| Control DNA pUC19,0.1ng/μl | 10μl |
实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA,供对照试验使用。
使用方法:
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意:
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
储存条件:-80℃。
柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家关键词:柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒,柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml),WE0175,Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
BL0818 HRP标记兔抗马IgG抗体
PY04-041 吖啶黄素(IV) 0.5mg/支×10支 " 每支添加于100ml牛津琼脂(OXA)基础培养基中
BL0639 羧甲基-琼脂糖凝胶CL-6B CM Sepharose CL-6B
5-*胞嘧啶 Chlorogenic acid 2022-85-7
PY04-067 TTC 0.1 mg/支×10支 每支添加于100mlTTC营养琼脂培养基基础中,用于药品卫生检验中细菌总数测定
ARB13727 兔热休克蛋白70(HSP-70)酶联免疫定量检测 Rabbit heat shock protein 70,hsp-70 ELISA KIT
γ-*基丁酸 HVA 56-12-2
BTN120615 dATP溶液,100mM dATP Solution
链霉素硫*(代"酸")盐 EGTA tetrasodiu*(代"m") 3810-74-0
BTN131122 考马斯亮蓝R-250 Coomassie Blue R-250
ARB10096 人EB病毒IgA(EBv IgA)Elisa定量检测 Human epstein-barr virus iga,ebv iga ELISA KIT
ARB11992 大鼠NPC1L1 酶联免疫定量检测
ARB10211 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)elisa检测说明书 Human β-lactamase inhibitors,bli ELISA KIT
F030229 HRP标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*HRP
BTN90903 无RNase的DNase溶液 RNase-Free DNase Solution
BL0872 羊抗猪IgG免疫血清
F030621 FITC标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*FITC
*化* PVPP 85017-82-9
SJ0734 牛外周血细胞分离液
DL-焦谷*酸 Bismuth citrate 149-87-1
我公司生产供应销*(代"售")的DNA纯化正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)北京厂家。
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