北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌
编号：WE0108
规格：5ml
英文名：2×Pfu MasterMix(With Dye)
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
  本品为Pfu DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Pfu DNA Polymerase具有5"-3"DNA聚合酶活性和5"-3"外切核酸酶活性的同时具有3"-5"外切核酸酶活性，因此在DNA扩增过程中具备纠错能力，是目前发现的错配率最低的耐高温DNA Polymerase。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，重复性好。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。本产品所含的Pfu DNA聚合酶具有错配率低，耐高温的特点，适用于基因克隆、基因定点突变、SNP和末端补平等反应。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml
2×Pfu MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×Pfu MasterMix含有Pfu DNA Polymerase, 3 mM MgCl2和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因；
4、2～8℃存放三个月，活性无明显改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Pfu MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3)Pfu酶具有3"-5"外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度远比Taq酶低，延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增延伸速率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
5)本产品具有3"-5"外切核酸酶活性，PCR产物为平端不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

欲了解更多北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
Rink-Amide树脂 β-Alanine ethyl ester HC1
花生四烯酸 Folin & Ciocalteu’s phenol reagent 506-32-1
ARB14252 人血幼素(HJV)elisa测定使用说明书 
F020205 山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3
BTN131157 藻红蛋白标记山羊抗兔IgG Goat Anti-Rabbit IgG ,PE Conjugate
ARB10842 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)Elisa方法检测 Human anti-respiRatory syncytial virus antibody,rsv ELISA KIT
BTN100885 X-Gal干粉 X -Gal Powder
BL1240 溶菌酶(100mg/ml)
PY01-157  *化*(无水)  1公斤  
硫*(代"酸")葡聚糖 Sodium iodide 9011-18-1
F020114 兔抗人丙型肝炎病毒抗体 Polyclonal Rabbit Anti-HCV
ARB12539 大鼠胰岛素受体β(ISR-β)elisa测定使用说明书 Rat insulin receptor β,isr-β ELISA KIT
BTN81207 半干法电转液(干粉) Half-Wet Transfer Buffer Powder
3522-50-7 柠檬酸铁
26177-56-6 D-果糖-6-磷酸二* D-Fructose 6-phosphate
9012-36-6 琼脂糖(西班牙分装)
L-*甘*醇 Cibacron Blue F3G-A 20989-17-7
BTN120308 植物叶绿体纯化试剂盒 Plant Chloroplast Purification Kit
ARB13438 鸡甲状腺素(T4)代做ELISA实验 Chicken thyroxine,t4 ELISA KIT
37348-90-4 两性电解质5-7
ARB13218 小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)血清中含量检测 Mouse stromal cell derived factor 1β,sdf-1β ELISA KIT
1,3-二甲基脲 Toluidine bule 96-31-3
北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌关键词：2×Pfu MasterMix,2×Pfu MasterMix(With Dye),WE0108,2×Pfu MasterMix(含染料)


·血清血浆尿液游离RNA提取试剂
编号：WE0201
英文名称：RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent
规格：50ml
  本品特别适用于从血清、血浆中分离纯化包括microRNA和其他小RNA(<200nt)在内的总RNA。本品灵活处理不同起始量的样品，在有效裂解样本的同时，可有效保存RNA的完整性，提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游实验。

自备试剂：*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
① 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用无RNase的水。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3、本品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
4、样品用游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂匀浆后，如不即刻加入*仿，置于-70℃可放置一个月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
6、若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNase I(货号：WE0213)对RNA进行处理。

操作步骤：
1、取200μl新鲜或者冻存的血清或血浆，加入3倍体积的游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂。振荡30秒，充分混匀。
注意：样本加入游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂后，可能会出现沉淀，经过振荡混匀后，沉淀基本消失。若仍有少量沉淀，不影响下游实验，可继续操作。
2、将处理后的样品在室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、向以上溶液中加入*仿，每使用1ml血清/血浆样本专用总RNA提取试剂加入0.2ml*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2-3分钟。
注意：如不能涡旋混匀，可手动快速颠倒混匀2分钟。
4、4℃ 12000rpm离心20分钟，此时样品分成三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA 主要在水相中，把水相转移到一个新的无RNase的离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温放置30分钟。或-20℃沉淀过夜，效果更佳。
6、4℃ 12000rpm 离心20分钟，弃上清。
注意：离心前RNA沉淀经常是看不见的，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂加入1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
8、4℃ 12000rpm离心3分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃RNA沉淀。
注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
9、室温放置2-3分钟，晾干。加入30-100μl无RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。

储存条件：2～8℃。


北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌关键词：2×Pfu MasterMix,2×Pfu MasterMix(With Dye),WE0108,2×Pfu MasterMix(含染料)


·RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号：WE0382
英文名称：Goat Anti-Rabbit IgG, Rhodanmine Red-X Conjugated
规格：100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体，特异识别兔IgG。使用本产品检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素，被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮，不容易淬灭，背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间，且重叠较少，RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。

免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Rhodamine Red-X，Amax=570; Emax=590
应用范围：对于大多数实验(1：25-100)

我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品，热情期待您的咨询选购北京现货2×Pfu MasterMix(含染料)品牌。