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2~8℃
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长期
- 英文名:
Ultra Bradford Protein Assay Kit
- 库存:
718
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")Bradford蛋白定量试剂盒折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应Bradford蛋白定量试剂盒折扣价,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:Ultra Bradford Protein Assay Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| Bradford蛋白定量试剂盒 | WE0275 | 800次微孔板(100管次) |
英文名:Ultra Bradford Protein Assay Kit
编号:WE0275
品牌:百奥莱博
Bradford 法是最简单和快速的比色蛋白定量方法。 这一方法基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后, 产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595 nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测595 nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。本产品将传统的Bradford方法进行了改良,最大限度的加大蛋白定量的线性范围,变异性小于普通考马斯亮蓝染色法,灵敏度范围为100-1,500μg/ml。使用本产品反应迅速,颜色产物1小时内保持稳定。本试剂盒适用于多种缓冲液系统,不受金属离子、还原剂和螯合剂的干扰。
试剂盒组成:
| 组成 | 规格 |
| Bradford Protein Assay Reagent | 2×100ml |
| BSA Standard Solution(2mg/ml) | 2ml |
注意事项:
1、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。
2、本试剂盒不适合含有去污剂的蛋白定量,具体干扰物质(具体见附表1),可采用BCA蛋白定量试剂盒(WE0276)或其他蛋白定量产品。
3、所测蛋白分子量必须大于3 kD。
使用方法:
1、稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
| 管号 | 稀释液用量(μl) | BSA标准品用量(μl) | BSA标准品最终浓度(μg/ml) |
| A | 0 | 100 | 2000 |
| B | 50 | 150 | 1500 |
| C | 200 | 200 | 1000 |
| D | 200 | 200(从C管中取) | 500 |
| E | 200 | 200(从D管中取) | 250 |
| F | 200 | 200(从E管中取) | 125 |
| G | 200 | 0 | 0(空白) |
2、试管检测(检测范围:100-1500μg/ml)
1)按上表稀释标准品,将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
2)取干净的试管,分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个测定做2-3个平行反应。
3)向步骤1)和步骤2)的试管中各加入1.5ml Bradford Protein Assay Reagent,充分混匀,室温放置10分钟。
4)用分光光度计测定595 nm处的吸光值。
5)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
6)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
3、微孔检测(检测范围:100-1500μg/ml)
1)将按表1稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各5μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。
2)每孔加入250μl Bradford Protein Assay Reagent,充分混匀,盖上96孔板盖,室温放置10分钟。
3)用酶标仪测定595 nm处的吸光值。
4)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
附表1. 干扰物质表
| 化合物 | 耐受浓度
|
| 缓冲液 | |
| 乙酸盐 | 0.6M |
| 甘*酸 | 0.1M |
| HEPES | 0.1M |
| MES | 0.7M |
| MOPS | 0.2M |
| Na+-柠檬酸 | 50mM |
| PIPES | 500mM |
| 磷酸*/磷酸* | 1M |
| 乙酸* | 0.6M |
| Tris | 2M |
| 盐类 | |
| 硫*(代"酸")铵 | 1M |
| NaCl | 1M |
| 尿素 | 6M |
| 极性化合物 | |
| 甘油 | 99% |
| 还原剂 | |
| β-巯基乙醇 | 1M |
| DTT | 1M |
| 去垢剂和变性剂 | |
| Brij35 | 干扰 |
| 脱氧胆酸纳 | 0.25% |
| CHAPS | 1% |
| NP-40 | 干扰 |
| 辛葡糖 | 2% |
| SDS | 0.1% |
| Tween-20 | 干扰 |
| Triton X-100 | 0.1% |
| 糖类 | |
| 蔗糖 | 1mM |
| 螯合剂 | |
| EDTA | 100mM |
| EGTA | 50mM |
| 其他 | |
| HCl | 0.1M |
| NaOH | 0.1M |
| NAD | 1mM |
| * | 5% |
储存条件:2~8℃
Bradford蛋白定量试剂盒折扣价专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:Ultra Bradford Protein Assay Kit ,Bradford蛋白定量试剂盒,WE0275
我公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、Bradford蛋白定量试剂盒、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| WE0376 | HRP标记抗体 | HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ) |
| WE0157 | 核酸扩增(PCR) | miRNA cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0235 | 基因结构和功能 | 双链DNA荧光定量试剂盒 |
| WE0227 | 其他分子生物学试剂 | 人类cDNA |
| WE0390 | 二抗 | AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0322 | 蛋白质研究 | IHC复染试剂(改良型苏木素) |
| WE0257 | 蛋白质研究 | RIPA裂解液(中) |
| WE0330 | 免疫检测 | 抗His标签抗体琼脂糖介质 |
| WE0397 | DNA纯化 | 游离DNA样本保存管(5ml,PET) |
| WE0288 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×) |
| WE0229 | 基因结构和功能 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Illumina平台) |
| WE0111 | 核酸扩增(PCR) | BaldStar Taq DNA Polymerase |
| WE0205 | DNA纯化 | 磁珠法DNA纯化回收试剂 |
| WE0387 | HRP标记抗体 | HRP标记兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0256 | 蛋白质研究 | 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合物 |
| WE0375 | HRP标记抗体 | HRP标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0371 | 生物素化抗体 | 生物素化驴抗人IgG(H+L) |
| WE0280 | 蛋白质研究 | 蛋白分子量Marker |
| WE0267 | 蛋白质研究 | His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白) |
| WE0186 | DNA纯化 | 鼠尾基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0266 | 蛋白质研究 | His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白) |
| WE0328 | 细胞凋亡与增殖 | Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒 |
| WE0129 | 核酸扩增(PCR) | 一步法RT-PCR试剂盒 |
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文献和实验发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G
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