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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Marine Animal DNA Extraction Kit
- 库存:
535
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括水产动物基因组提取试剂盒销*(代"售")在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:水产动物基因组提取试剂盒销*(代"售")
规格:50次
产地:国产|进口
编号:WE0182
英文名:Marine Animal DNA Extraction Kit
本试剂盒适合于从多种水产动物(如鱼类、虾类、贝类等)组织中提取总DNA。纯化过程不需*酚或*仿等有机溶剂,无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅胶质离心吸附柱上,其他污染物可流过膜,蛋白、PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
不同水产动物组织提取得率:
| 样本 | 建议孵育时间 | DNA得率 |
| 贝类组织 | 0.5 h | 12-20μg |
| 虾组织 | 1 h | 8-14μg |
| 鱼组织 | 1 h | 15-40μg |
操作步骤:
1、取不超过30 mg组织材料,液氮充分研磨后,放入离心管(自备)中,加入200μl Buffer GTL,涡旋振荡15秒。
注意:
1)根据提取的组织不同,起始量也有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20 mg。
2)如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
2、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋混匀,简短离心,使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育,直至组织完全溶解,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2小时即可完成。对于难裂解组织可以适当延长孵育时间。
3、加入200μl Buffer GL,充分颠倒混匀,70℃孵育10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入Buffer GL时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4、加入200μl无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能出现絮状沉淀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
5、将步骤4所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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水产动物基因组提取试剂盒销*(代"售")关键词:WE0182,水产动物基因组提取试剂盒,Marine Animal DNA Extraction Kit
·G250蛋白快速染色试剂
编号:WE0290
英文名称:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格:250ml
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
水产动物基因组提取试剂盒销*(代"售")关键词:WE0182,水产动物基因组提取试剂盒,Marine Animal DNA Extraction Kit
·山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0380
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG
规格:100μl
本产品为经抗原亲和纯化未标记的山羊抗兔IgG抗体,特异识别兔IgG,可与各种酶、荧光素等标记后用于免疫学、分子生物学及临床医学各个学科中,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
抗体浓度:2 mg/ml
防腐剂:无
·罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0378
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, TRITC Conjugated
规格:100μl
本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。使用本产品检测灵敏度高,本底低,稳定性好。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,激发后呈现明亮的橙红色荧光。与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
·BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)
编号:WE0324
英文名称:BCIP/NBT Kit(40×)
规格:40ml
BCIP是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
试剂盒组成:
| 组份 | 40ml |
| 40×BCIP | 1ml |
| 40×NBT | 1ml |
| BCIP/NBT Buffer | 40ml |
注意事项:
1、工作液应现配现用,配制好的工作液1小时内有效。
2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
4、NBT有毒,使用时请采取必要的防护措施。
5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、BCIP/NBT显色工作液配制:根据需要量,将40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的体积比混匀后,即为BCIP/NBT显色工作液。
2、显色:
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到BCIP/NBT显色工作液中),室温避光孵育3-10分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育3-10分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购水产动物基因组提取试剂盒销*(代"售")。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP322 口腔拭子基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 口拭子2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),2 ml离心管3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机注意:为了保证样本不被食物或者饮料污染,取样前 30 min内请勿进食和饮水。实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,实验准备-试剂盒准备1:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2:准备实验时,将缓冲
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