北京WE0181型酵母基因组DNA提取试剂盒哪里卖

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北京百奥莱博专业生产供应北京WE0181型酵母基因组DNA提取试剂盒哪里卖，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：酵母基因组DNA提取试剂盒
英文名：Yeast Genomic DNA Extraction Kit
品牌：百奥莱博
规格：50次
编号：WE0181
产地：国产|进口
  本试剂盒适用于从酵母样品中提取高纯度的总DNA，本品无需使用*酚、*仿等有机溶剂抽提，可获得最大为50 kb的DNA，同时对100 bp的DNA片段也能有效的回收。本试剂盒采用优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效结合在硅胶膜上，而其他污染物可流过膜，使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度的DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml
Lyticase Working Buffer	30ml
Lyticase	300μl
Glass Beads	2g
吸附柱DM及收集管	50套

保存条件：Lyticase -20℃，其他组分室温(15～30℃)。

自备试剂：无水乙醇，β-巯基乙醇。

产品特点
1、适用于从酵母样品中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀，彻底去除污染物及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。
3、Lyticase酶与玻璃珠共同作用，有效破除酵母细胞壁。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。对于有些细胞壁较厚以及在培养阶段会产生大量代谢物的酵母，建议在生长早期收集样品。
3、Lyticase Working Buffer在使用前请加入β-巯基乙醇，使其终浓度为0.1%。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GTL和Buffer GL于65℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。

操作步骤：
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个细胞，一般对于酿酒酵母OD600=1.0时，相当于1-2×107细胞/ml)，12000rpm(～13400×g)离心1分钟，收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
注意：菌液较多时，可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2、酵母细胞壁的去除：向菌体中加入600μl Lyticase Working Buffer(使用前检查是否加入β-巯基乙醇，使其终浓度为0.1%)，并加入5μl Lyticase，充分混匀。30℃处理30分钟。4000rpm(~1,500×g)离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
注意：以上为5×107酵母细胞Lyticase用量，根据酵母的菌株和酵母细胞数量的不同，所用的Lyticase的浓度和孵育时间应该进行适当调整。
3、向沉淀中加入200μl Buffer GTL，加入40 mg玻璃珠(Glass Beads)，涡旋5分钟。
4、加入20μl 蛋白酶K 混匀。55℃振荡水浴至细胞完全裂解。若无振荡水浴箱，温育期间每20-30分钟颠倒混匀一次。(一般不超过1小时细胞即可完全裂解)。
注意：如需去除RNA，在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
5、12000rpm离心5分钟，小心吸取上清至新离心管中。
6、加入200μl Buffer GL，充分混匀。70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次，12000rpm离心5分钟，将上清移到一个新的离心管中。
注意：若孵育后溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取的DNA不纯。
7、加入200μl无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
8、将步骤7所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
12、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。
关键词：酵母基因组DNA提取试剂盒,Yeast Genomic DNA Extraction Kit,WE0181


北京WE0181型酵母基因组DNA提取试剂盒哪里卖极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

 

编号	名称
WE0392	FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0332	抗c-Myc标签单克隆抗体
WE0337	抗Flag标签单克隆抗体
WE0210	UltraStain核酸染料
WE0151	快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)
WE0132	cDNA第一链合成试剂盒
WE0237	T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
WE0321	一抗稀释液(WB IHC)
WE0324	BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)
WE0377	HRP标记山羊抗人IgA
WE0117	BalbMulti多重PCR Mix
WE0240	二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
WE0340	抗VSV-G标签单克隆抗体
WE0162	高纯质粒小提试剂盒
WE0346	抗GFP标签单克隆抗体
WE0339	抗RFP标签单克隆抗体
WE0164	高纯质粒大提试剂盒
WE0138	一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
WE0327	Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
WE0226	人类基因组DNA
WE0402	唾液DNA样本保存管
WE0186	鼠尾基因组DNA提取试剂盒
WE0391	AP标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0281	蛋白银染试剂盒
WE0104	2×Bes Taq MasterMix(含染料)
WE0172	新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
WE0383	Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0404	RNA样本保存液
WE0380	山羊抗兔IgG(H+L)
WE0272	Ni琼脂糖凝胶
WE0252	DH5α感受态细胞
WE0336	抗His标签鼠克隆抗体
WE0312	PBS(pH7.5,10×)
WE0207	磁珠法唾液DNA提取试剂盒
WE0185	血块基因组DNA提取试剂盒
WE0179	口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
WE0170	DNA产物快速纯化试剂盒
WE0153	快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料)
WE0314	免疫组化试剂盒(兔源一抗)
WE0304	蛋白印迹膜再生液
WE0289	SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)