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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃,避免冷冻
- 保质期:
长期
- 英文名:
Protein A-Agarose
- 库存:
591
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Protein A琼脂糖凝胶价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Protein A琼脂糖凝胶
英文名:Protein A-Agarose
规格:5ml
编号:WE0271
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性,高流速,低Protein A-Agarose脱落等特点。
注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,抗体浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法:
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下。
| 抗体 | 平衡缓冲液成分 |
| 人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b | 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5 |
| 人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 | 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5 |
2、洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸*缓冲液,pH4.0。
3、再生缓冲液:1 M NaCl。
4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
注意:收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,最后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
储存条件:2~8℃,避免冷冻
关键词:Protein A-Agarose,WE0271,Protein A琼脂糖凝胶
更多有关北京Protein A琼脂糖凝胶价格厂家的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0105 | BAmp DNA Polymerase |
| WE0228 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Ion Torrent平台) |
| WE0277 | SDS-PAGE快速电泳液 |
| WE0168 | 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0389 | 生物素化兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0318 | 柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×) |
| WE0355 | 抗β-Tubulin单克隆抗体 |
| WE0100 | PCR Mix(含染料)(滴瓶装) |
| WE0274 | 蛋白标准溶液BSA |
| WE0101 | Taq DNA Polymerase |
| WE0139 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料) |
| WE0113 | BaHF高保真DNA聚合酶 |
| WE0367 | 罗丹明标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0243 | Super DNA Ladder |
| WE0242 | UltraStain DNA Marker |
| WE0198 | 动物组织/细胞RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0283 | Tris-甘*酸蛋白电泳液(pH8.3, 10×) |
| WE0186 | 鼠尾基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0221 | 6×DNA上样缓冲液 |
| WE0324 | BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC) |
| WE0278 | 蛋白快速染色液 |
| WE0272 | Ni琼脂糖凝胶 |
| WE0189 | 高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法) |
| WE0216 | 50×TAE |
| WE0183 | 游离DNA提取试剂盒 |
| WE0119 | 结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3) |
| WE0267 | His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白) |
| WE0164 | 高纯质粒大提试剂盒 |
| WE0335 | HRP标记抗His标签单克隆抗体 |
| WE0381 | Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0165 | 酵母质粒提取试剂盒 |
| WE0162 | 高纯质粒小提试剂盒 |
| WE0193 | 超纯RNA提取试剂盒(DNase I) |
| WE0351 | 抗His标签多克隆抗体 |
| WE0144 | 实时荧光定量PCR的预混体系(探针法) |
| WE0392 | FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0138 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(低含量ROX校正染料) |
| WE0206 | 磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0305 | 丽春红染色试剂 |
| WE0202 | 新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0199 | 细菌RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0195 | miRNA提取试剂盒 |
| WE0177 | 柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1~5ml) |
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