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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻
- 保质期:
长期
- 英文名:
BaldStar Taq DNA Polymerase
- 库存:
697
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BaldStar Taq DNA Polymerase价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京BaldStar Taq DNA Polymerase价格
编号:WE0111
英文名:BaldStar Taq DNA Polymerase
规格:500U|2500U
产地:国产|进口
BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效的Taq DNA Polymerase,在常温下酶的活性被完全封闭,使得该酶在低温或常温下没有活性,从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛,使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板,均能高效扩增。用本品进行PCR扩增,PCR产物3"末端含有A,可直接用于T/A 克隆。本产品特异性强,PCR扩增后无需胶回收去除杂带,可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR、Real-time PCR、多重PCR、基因芯片分析和SNP检测,特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500U |
| BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 5×BaldStar PCR Buffer | 1.9ml | 5×1.9ml |
注意:本产品的5×BaldStar Taq PCR Buffer中含有8.5mM*离子。
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、SDS-PAGE检测纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残留DNA;
4、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 5×BaldStar PCR Buffer | 10μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度,请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 30 s | 30-40个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,退火时间一般为30-60 s,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京BaldStar Taq DNA Polymerase价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·口腔拭子DNA样本保存管
编号:WE0395
规格:200μl×10支
本产品采用医疗专用的聚*脂海绵为原材料,具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断,使用方便。采用的物料对微生物无毒害,能大量地增加样本的采集、释放量,增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月,其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验,如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便,并减低其成本。
使用方法
1、取样前清洁双手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物残渣,咽尽口腔中剩余的清水。
2、撕开采样棉签外包装。
3、将棉签伸进口腔内,在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上,至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4、打开样本采集管盖,将采样后的棉签放入样本采集管内,沿手柄上的折痕折断手柄。
5、随即盖上样本采集管,完成样品取样。
·山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0380
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG
规格:100μl
本产品为经抗原亲和纯化未标记的山羊抗兔IgG抗体,特异识别兔IgG,可与各种酶、荧光素等标记后用于免疫学、分子生物学及临床医学各个学科中,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
抗体浓度:2 mg/ml
防腐剂:无
北京BaldStar Taq DNA Polymerase价格关键词:BaldStar Taq DNA Polymerase,WE0111
抗坏血酸-6-棕榈酸酯 Ara-A 137-66-6
D0601 脱纤维兔血(无菌 pet瓶装) 100ml
9003-39-8 PVP40000 聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮
ARB12395 大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)定量分析 Rat monocyte chemotactic protein 4,mcp-4 ELISA KIT
DP203 超薄产物纯化试剂盒
PY02-071 西蒙氏枸橼酸盐琼脂 250克
ARB12653 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白(EotAxIn 1/CCL11)Elisa方法检测 Rat eotaxin 1 ELISA KIT
71-30-7 Cytosine 胞嘧啶
CYB165027 生物素化羊抗大鼠IgG
羟yi基-β-环糊精 Aldosterone 128446-32-2
N-三(羟甲基)甲基甘*酸 Inosine 5704-04-1
ARB11959 大鼠Apelin 12(AP12)酶标法分析 Rat apelin 12,ap12 ELISA KIT
金属硫蛋白 Valinomycin
ARB11792 人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)Elisa定量检测 Human basic fibroblast growth factor 4,bfgf-4 ELISA KIT
北京BaldStar Taq DNA Polymerase价格关键词:BaldStar Taq DNA Polymerase,WE0111
·双链DNA荧光定量试剂盒
编号:WE0235
英文名称:dsDNA Assay Kit for Qubit
规格:100次|500次
本试剂盒是一种简便、灵敏、精确的双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含即用型荧光检测试剂和相关的dsDNA标准品。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性,在0.2~100ng区间具有很好的线性关系,是一种快速、简单、灵敏的DNA定量方法。
本试剂盒操作简单方便,使用时只需将即用型荧光检测试剂与待测dsDNA样品混合,即可使用荧光酶标仪或Qubit®荧光仪进行读数。操作简单,结果可靠,是二代测序大规模DNA样品定量的理想选择。本试剂盒对一些常规的污染物如蛋白质、盐类物质、洗涤剂等具有较好的耐受性。
·TBS(pH8.0,10×)
编号:WE0313
英文名称:dsDNA Assay Kit for Qubit
规格:500ml
本试剂盒是一种简便、灵敏、精确的双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含即用型荧光检测试剂和相关的dsDNA标准品。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性,在0.2~100ng区间具有很好的线性关系,是一种快速、简单、灵敏的DNA定量方法。
本试剂盒操作简单方便,使用时只需将即用型荧光检测试剂与待测dsDNA样品混合,即可使用荧光酶标仪或Qubit®荧光仪进行读数。操作简单,结果可靠,是二代测序大规模DNA样品定量的理想选择。本试剂盒对一些常规的污染物如蛋白质、盐类物质、洗涤剂等具有较好的耐受性。
·SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
编号:WE0293
英文名称:SDS-PAGE Gel Kit
规格:40-60 gels|200-300 gels
本试剂盒包括SDS-PAGE凝胶制备所需全*(代"套")试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的变性PAGE凝胶,方便、快捷。本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
试剂盒组成:
| 组份 | 40-60 gels | 200-300 gels |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 100ml | 2×250ml |
| SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) | 100ml | 500ml |
| SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) | 50ml | 250ml |
| APS | 0.5 g | 2.5 g |
| TEMED | 1ml | 5 m l |
本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水、2.5 g APS加25ml纯水),将溶液分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。
注意事项:
1、10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
2、PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关;在其它条件不变的情况下,可通过改变APS及TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作;附表中的APS及TEMED量可供参考,应根据实际操作情况做适当的调整。
3、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
4、在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
5、丙*(代"烯")酰胺具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
6、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2.将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer和纯水在小烧杯或试管中混合。
3.加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150 kD |
| 8%胶 | 30-90 kD |
| 10%胶 | 20-80 kD |
| 12%胶 | 12-60 kD |
| 15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) |
10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) |
10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
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Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain
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