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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒批发

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  • ¥100 - 1750
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0293-SKN
  • 2025年07月05日
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    • 英文名

      SDS-PAGE Gel Kit

    • 库存

      634

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应SDS-PAGE凝胶制备试剂盒批发,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:SDS-PAGE凝胶制备试剂盒批发
    产地:国产|进口
    规格:40-60 gels|200-300 gels
    编号:WE0293
    品牌:百奥莱博
      本试剂盒包括SDS-PAGE凝胶制备所需全*(代"套")试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的变性PAGE凝胶,方便、快捷。本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。

    试剂盒组成

     
    组份 40-60 gels 200-300 gels
    30%Acr-Bis(29:1) 100ml 2×250ml
    SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) 100ml 500ml
    SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) 50ml 250ml
    APS 0.5 g 2.5 g
    TEMED 1ml 5 m l

    本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水、2.5 g APS加25ml纯水),将溶液分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。

    注意事项
    1、10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
    2、PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关;在其它条件不变的情况下,可通过改变APS及TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作;附表中的APS及TEMED量可供参考,应根据实际操作情况做适当的调整。
    3、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
    4、在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
    5、丙*(代"烯")酰胺具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
    6、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。

    操作步骤
    根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。

    I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
    1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
    注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
    2.将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer和纯水在小烧杯或试管中混合。
    3.加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    4.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
    5.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。

    II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
    1、去除覆盖在分离胶上的水层。
    2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
    3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
    5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
    6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
    7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
    8、进行常规电泳操作。

    附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
    SDS-PAGE 分离胶浓度 最佳分离范围
    6%胶 50-150 kD
    8%胶 30-90 kD
    10%胶 20-80 kD
    12%胶 12-60 kD
    15%胶 10-40 kD


    附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
    分离胶浓度 凝胶体积 所需各组分体积(单位:ml)
    纯水 30%Acr-Bis(29:1) SDS-PAGE Separating
    Gel Buffer(4×)
    10%APS TEMED
    6% 5ml 2.75 1.0 1.25 0.05 0.004
    10ml 5.5 2.0 2.5 0.1 0.008
    15ml 8.25 3.0 3.75 0.15 0.012
    20ml 11 4.0 5 0.2 0.016
    8% 5ml 2.42 1.33 1.25 0.05 0.003
    10ml 4.8 2.7 2.5 0.1 0.006
    15ml 7.25 4.0 3.75 0.15 0.009
    20ml 9.7 5.3 5 0.2 0.012
    10% 5ml 2.08 1.67 1.25 0.05 0.002
    10ml 4.17 3.33 2.5 0.1 0.004
    15ml 6.25 5.0 3.75 0.15 0.006
    20ml 8.3 6.7 5 0.2 0.008
    12% 5ml 1.75 2.0 1.25 0.05 0.002
    10ml 3.5 4.0 2.5 0.1 0.004
    15ml 5.25 6.0 3.75 0.15 0.006
    20ml 7.0 8.0 5 0.2 0.008
    15% 5ml 1.25 2.5 1.25 0.05 0.002
    10ml 2.5 5.0 2.5 0.1 0.004
    15ml 3.75 7.5 3.75 0.15 0.006
    20ml 5 10.0 5 0.2 0.008


    附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
    凝胶体积 所需各组分体积(单位:ml)
    纯水 30%Acr-Bis(29:1) SDS-PAGE Stacking
    Gel Buffer(4×)
    10%APS TEMED
    2ml 1.14 0.34 0.5 0.02 0.002
    4ml 2.28 0.68 1 0.04 0.004
    6ml 3.42 1.02 1.5 0.06 0.006
    8ml 4.56 1.36 2 0.08 0.008


    储存条件:2~8℃

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    ·Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)
    编号:WE0381
    英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, Cy3 Conjugated
    规格:100μl
    本产品为Cy3标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG,可以与TRITC使用相同的滤光片。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。

    免疫原:兔IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    荧光团:Cy3 bis-NHS ester,Amax=550; Emax=570
    应用范围:对于大多数实验(1:50-400)

    ·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
    编号:WE0369
    英文名称:Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
    规格:100μl
    本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,更加不容易淬灭,且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。

    免疫原:大鼠IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
    应用范围:对于大多数实验(1:50-200)



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