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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
ISRE GFP Reporter Plasmid
- 库存:
675
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售")在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售")
编号:SY0170
规格:1μg
英文名:ISRE GFP Reporter Plasmid
品牌:百奥莱博
ISRE GFP Reporter Plasmid是用于检测STAT1/STAT2转录活性水平为目的的报告基因。STATs是一类重要的核转录因子,共包括STAT1~STAT4,STAT5a,STAT5b及STAT67个成员,它们与细胞增殖、分化和凋亡密切相关,其中STAT1和STAT2参与了细胞的凋亡控制。
ISRE-GFP报告基因主要检测细胞Type I Interferon信号通路中STAT1/STAT2的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMISRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个STAT1/STAT2结合位点,可以高效地检测STAT1/STAT2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得ISRE-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM ISRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMISRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
欲咨询购买ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售"),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)
编号:SY0480
英文名称:Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
规格:20T
Caspase 3,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也称CPP32、Yama或apopain,属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,且可以直接特异性剪切多种Caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cell blebbing)过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等。
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase 3活性的试剂盒,其检测原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性(黄色产物与Caspase 3酶的活性成正比)。 另外,本试剂盒中还提供了Caspase 3催化产生的黄色产物pNA,以此作为定量caspase 3酶活性的标准品。

试剂盒组份:
Lysis Buffer裂解液————8ml
Assay Buffer检测缓冲液——8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
pNA(10mM)————————200μl
注意事项
1)建议Ac-DEVD- pNA分装保存,尽量避免反复冻融;
2)pNA(中文名为4-硝基*(代"*")胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3)有报道少数类型细胞凋亡检测不到Caspase 3 的激活;
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃
ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售")关键词:ISRE-GFP报告基因质粒,SY0170,ISRE GFP Reporter Plasmid
·脱氧鸟苷三磷酸溶液(100 mM)(dGTP)
编号:SY0044
英文名称:dGTP Solution(100 mM)
规格:400ul
dGTP即2’-deoxyguanosine 5’-triphosphate,中文名为脱氧鸟苷三磷酸,常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
本产品为溶液*盐形式,用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM。
经检测,dGTP纯度大于99%(HPLC),且无DNase和RNase污染。本产品为即用型,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
注意事项
1)可以室温溶解,溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
·MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
编号:SY0506
英文名称:MTT Cell Proliferation Assay Kit
规格:500T
本试剂盒以MTT(高纯度)作为指示剂,在经典操作步骤的基础上,采用独特的甲臜溶解液配方,可以直接溶解甲臜沉淀,无需去除原有的培养液。从而避免因去除培养液时甲臜被部分去除而引起的操作误差。具有本底低,灵敏度高,线性范围宽,操作简单等特点。另外,本试剂盒还提供配套的一次性针头过滤器和注射器,为实验带来更多的便利。
噻唑兰(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也称作*化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法,用来检测细胞的活力,细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于:MTT是一种可接受*离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱*酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶,而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来,酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比,用以评估细胞存活状况。
产品组份:
MTT粉末——————25mg
MTT溶剂——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套装—————1包
注意事项
1)甲臜溶解液具有腐蚀性和毒性,使用时注意防护。
2)MTT有致癌性,应小心操作;MTT溶液需要无菌,因其对菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超过1周,因其可能发生降解,导致检测结果错误。
3)MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT吸光度最好在0-0.7范围内。
4)使用微孔板进行检测,如果细胞培养时间比较长,需要注意蒸发的问题。一般情况,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,建议弃用周围一圈的方法,改加PBS,水或者细胞培养液等。也可通过将96孔板放在靠近培养箱内水源的位置,以减缓蒸发现象。
5)甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀,只需37℃水浴使其充分溶解,混匀后即可使用。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃,有效期1年
ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售")关键词:ISRE-GFP报告基因质粒,SY0170,ISRE GFP Reporter Plasmid
·阿尔玛蓝
编号:SY0503
英文名称:Alamar Blue
规格:100T
阿尔玛蓝(Alamar Blue)是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸亮度变化和荧光信号。这是一种安全无毒的染料,可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究,能有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。Alamar Blue在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗,因而常被用作氧化还原指示剂,以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性,因此对应的信号较低。可以用普通分光光度计或荧光光度计检测,其激发光波长在530-560 nm之间,发射光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。
本品可广泛地用于细胞增殖代谢,药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的的快速检测与鉴定。 与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比,Alamar Blue具有更多的优势。Alamar Blue采用单一试剂,可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于Alamar Blue对细胞无毒、无害,不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。
注意事项
1)需客户自行准备100%还原型Alamar Blue试剂。为得到还原型Alamar Blue,需配制Alamar Blue与细胞培养基的混合溶液,Alamar Blue与细胞培养基的比值为1:10,高压灭菌15min。(不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌,也不能用PBS配制溶液,因为100%还原型Alamar Blue在PBS中不稳定。)
2)为得到最好的结果,建议实验前先摸索孵育时间和接种细胞数量。
3)合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96 孔板,我们建议每孔接种100 微升细胞,细胞浓度范围为:贴壁细胞在100-10,000/孔,悬浮细胞在2,000-50,000/孔,并以培养基为空白对照。对于384 孔板,细胞浓度和接种量均减半。
4)整个过程均应为无菌操作,因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
5)注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长,会导致继发性还原反应,产生无色和荧光消失。
6)孵育时,须避光。
7)本产品可以使用荧光或分光光度计检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,推荐使用荧光检测。
储存条件:4℃,有效期一年
我公司正在火爆促销报告基因检测系列产品,欢迎您的垂询选购ISRE-GFP报告基因质粒销*(代"售")。
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文献和实验xiongran 急求ISRE报告基因质粒,干扰素信号通路的报告基因,愿拿其它质粒作为交换! shuyangsy1986 大哥,现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊,还有β-干扰素的啊,我也需要啊,先谢了啊 xiongran 几百年前的事情了,没有求到,我都不做这个了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
小猪默默 请教高人: 我现在想用GFP做报告基因,在大肠杆菌中表达蛋白,想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗?有没有人对GFP基因进行过改造?让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光? Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白,那么转化含GFP基因的表达载体即行。 2、如果你想表达GFP融合蛋白,那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意
表达后修饰,直接具有完全酶活。发光机制生物荧光实质是一种化学荧光。萤火虫荧光素酶在Mg2+、ATP、O2的参与下,催化D2荧光素(D2luciferin) 氧化脱羧,产生激活态的氧化荧光素,并放出光子,产生550~580 nm 的荧光,其化学反应式如下。这种无需激发光就可发出偏红色的生物荧光,其组织穿透能力明显强于绿色荧光蛋白(GFP)。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光,特异性很强,灵敏度高,由于没有激发光的非特异性干扰,信噪比也比较高。二、荧光素酶报告基因的检测流程1、重组质粒制备: 制备含有
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