E2F-GFP报告基因质粒

特别提示：包括E2F-GFP报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：E2F-GFP报告基因质粒
英文名称：E2F GFP Reporter Plasmid
产品货号：SY0198
产品规格：1μg

E2F-GFP报告基因是用于检测E2F转录活性水平为目的的报告基因。E2F转录因子在细胞周期调控中起重要的作用。研究证明，E2F-1对细胞的生长具有双向调节作用，可以调节细胞的增殖和凋亡。因此，E2F与肿瘤发生、细胞凋亡、肿瘤抑制等均有密切关系。

E2F-GFP报告基因主要用于检测细胞中Cell Cycle信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGME2F-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个E2F结合位点，可以高效地检测E2F的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得E2F-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM E2F -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGME2F-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

除了E2F-GFP报告基因质粒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：RAR萤火虫荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0066
规格：1μg
RAR-Luc荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（RAR luciferase reporter plasmid）是用于检测RAR转录活性水平为目的的报告基因。视黄酸是一种亲脂性分子和维生素A的代谢物，影响基因的转录和一些生物进程的调节，例如细胞增殖、凋亡和分化等。视黄酸对基因转录的调控取决于视黄酸到靶细胞运输率和在目标组织中视黄酸对RAR(Retinoic Acid Receptor)的曝光时间。

RAR报告基因主要用于检测细胞中RAR调控的信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMRAR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个RAR结合位点，可以高灵敏度地检测RAR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得RAR报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1. pGMRAR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2. RAR的激活剂，可作为RAR报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。

名称：AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0095
规格：1μg
AhR荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（AhR luciferase reporter plasimd）是用于检测AhR转录活性水平为目的的报告基因。芳香族化合物受体(Aryl
hydrocarbon receptor, AhR)是一个核受体转录因子。AhR广泛地参与多种细胞内的信号通路,包括核受体信号通路,缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)信号通路,p53信号通
路以及细胞周期信号通路等。AhR通过对细胞内不同信号通路的调节作用从而影响了细胞的生长,增殖以及分化等过程。另外,AhR与癌症的发生和发展也密切相关,在许多的肿瘤细胞中都
发现了AhR的异常表达。

AhR报告基因主要用于检测细胞中AhR的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表性分析等。

pGMAhR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AhR结合位点，可以高灵敏度地检测AhR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结
合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得AhR报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMAhR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

名称：HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0130
规格：1μg
HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒（HNF1 luciferase reporter plasmid）是用于检测HNF1转录活性水平为目的的报告基因。HNF1((hepatocyte nuclear factor 1)是HNFs家族的主要成员之一，是调控肝功能基因表达的重要转录因子，对促进肝脏发育和维护肝细胞生物学功能发挥重要作用。

HNF1-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Hepatocyte Nuclear Factor 1信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMHNF1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个HNF1结合位点，可以高灵敏度地检测HNF1的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得HNF1报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMHNF1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：NF-κB-GFP报告基因质粒
货号：SY0153
规格：1μg
NF-κB-GFP报告基因是用于检测NFκB转录活性水平为目的的报告基因。 NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和抑制细胞凋亡等方面有着重要的作用。

NF-κB-GFP报告基因主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-KB的调控机制的研究。

pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点，可以高效地检测NF-κB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NF-κB-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMNF-κB -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMNF-κB -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂，可作为NF-κB报告基因的阳性对照。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：GATA-GFP报告基因质粒
货号：SY0177
规格：1μg
GATA-GFP报告基因是用于检测GATA转录活性水平为目的的报告基因。GATA(globin transcription factor)转录因子家族包括6锌指结合蛋白调控细胞的增殖和分化。GATA家族成员涉及造血、心脏和消化道的发育。

GATA-GFP报告基因主要用于检测细胞中球蛋白信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMGATA-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GATA结合位点，可以高效地检测GATA的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得GATA-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM GATA -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMGATA-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：腔肠素n
货号：SY0240
规格：1×250μg
本品为粉末形式供应的腔肠素n（Coelenterazine n），所有的腔肠素衍生物中荧光强度是最弱的，且对Ca2+反应速率也明显低于天然腔肠素。非常有用的Ca2+低灵敏检测底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM。
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：CLZN-n
分子式：C30H23N3O2
分子量：457.52
溶解性：溶于*醇或者乙醇，不溶于DMSO
外观：黄色至棕色粉末
纯度：≥95%（TLC）
结构：


注意事项
1）腔肠素n粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，可能造成腔肠素n氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。