FITC标记鬼笔环肽多少钱

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FITC标记鬼笔环肽多少钱的品牌：百奥莱博，是优质的探针标记及检测产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多FITC标记鬼笔环肽等探针标记及检测产品请联系我司咨询订购。

名称：FITC标记鬼笔环肽多少钱
英文名：FITC Phalloidin
规格：300T
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本品为FITC标记的鬼笔环肽，染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外，经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。

鬼笔环肽（Phalloidin）是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）的环状七肽毒素，以高亲和力（Kd= 20 nM）选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin，而不会与单体肌动蛋白G-actin结合，通常用来标记组织切片，细胞培养物或无细胞体系中的F-actin，从而对F-actin进行定性和定量分析。另外，鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略，染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此，鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白（Actin）抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小，直径约12-15Å，分子量＜2000 Daltons，未标记肌动蛋白（Actin）的许多生理特性都得以维持，比如，同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能发生反应；鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质；以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。

鬼笔环肽（Phalloidin）的结合阻止丝状肌动蛋白（微丝）的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度（CC）降至＜1µg/mL，因此，可用作一种聚合促进剂。此外，鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。

分子式：C56H60N10O15S2
分子量：1177.3
最大激发/发射波长：495~496/513~516nm
多肽序列：FITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6)
外观：黄色粉末（冻干粉）
溶解性：溶于DMSO、DMF、甲醇或者乙*(代"腈")水溶液（20%）
储存条件：-20℃避光，有效期一年

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·曲拉通X-100(分子生物学级)
编号：SY0308
英文名称：Triton X-100, Molecular Biology Grade
规格：500ml
Triton X-100，中文名字曲拉通X-100，一种非离子表面活性剂（结构类似于igepal、NP-40），在分子生物学及免疫学中用于促进脂质和蛋白质的溶解，可用于多种实验，如细胞裂解、蛋白提取、酶类储存液以及其他蛋白稳定液的配制、ICC/IHC等。

英文别名：X-100；T-octylphenoxypolyethoxyethanol
CAS：9002-93-1
分子式：C34H62O11
分子量：647
密度：1.065g/ml（25℃）
外观：无色或淡黄色微混夜体。
纯度：>98%
溶解性：溶于水
储存条件：室温
结构式


·1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)
编号：SY0321
英文名称：1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
规格：100ml
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（1×），裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 培养细胞样品：
1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。


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·Alexa Fluor 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：SY0683
英文名称：Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
规格：100μl
品是由Alexa Fluor 488标记的山羊抗小鼠IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子，也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC，Amax（最大激发波长）为493nm，Emax（最大发射波长）为519nm。

本品适合做单标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 488, Amax=493, Emax=519
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:50～400（适用于大多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·聚凝胺
编号：SY0605
英文名称：Polybrene (hexadimethrine bromide)
规格：500ul
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。

操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)

实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1）重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37℃预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。


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·SYBR Green I 核酸凝胶染料
编号：SY0257
英文名称：SYBR Green I (10,000×in DMSO)
规格：100μl
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。SYBR Green I，一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料，常用于核酸琼脂糖凝胶/聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。SYBR Green I染料的最大激发波长为497nm，但是在～290nm和～380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520nm。因此，该染料可适用于多种凝胶检测仪。

独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I 的致突变性明显比*化乙锭要低得多，目前尚无关于SYBR Green I 染料对人体的致突变性或毒性的数据，但我们必须提醒用户注意，该染料能与DNA结合，因此，它应当被看做潜在诱变剂，在使用前小心谨慎。另外，在处理DMSO储存液时应特别小心，因为DMSO能促进有机分子进入组织。染料的处理应当符合当地的规定。

使用方法

【开始使用前】
使用前将本品取出并回温至室温，使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液至管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存，小份染料将更快速熔解。

一、 染色
1 电泳后DNA染色
1）在琼脂糖或非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶上进行电泳。
【注】：TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染料。
2）用TE、TAE或TBE将SYBR Green I进行10000倍稀释。
【注】：
① SYBR Green I染色对pH敏感，为获得最佳的灵敏度，应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-8.0之间（pH8.0更佳）。
② 用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定，为得到较好灵敏度，必须在24h内使用。
3）染液要充分覆盖凝胶，室温轻摇孵育10-40min。
【注】：
① 推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液，应为染料会吸附到玻璃表面。
② 染色过程避光进行，建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。
③ 凝胶厚度及琼脂糖或聚丙*(代"烯")酰胺的比例不同，染色时间将有所不同。
④ 无需脱色。
⑤ 染液可置暗处（最好是冷藏）放置至少1周，重复使用最多4次。
2 电泳前DNA染色
1）一般选择配制成SYBR Green I预制凝胶来实验。
临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1：10000倍稀释到凝胶溶液中，预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶。预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限（大约为30-40pg/条带），略高于电泳后染色（＜20pg/条带）。此外，在SYBR Green I凝胶中的DNA片段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。
2）作为DNA模板预染标记。
一般而言，DNA在电泳前与染料工作液至少孵育15min。
二、 凝胶成像（紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射）
可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。
三、从双链DNA中去除SYBR Green I
将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl中，加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min，在4℃离心至少10min。去除乙醇，并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发，用TE重悬双链DNA即可。

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