RIPA裂解液(弱)厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")RIPA裂解液(弱)厂商，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：RIPA裂解液(弱)厂商
产地：国产|进口
规格：100ml
英文名：RIPA lysis buffer (Weak)
品牌：百奥莱博
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

除RIPA裂解液(弱)厂商外，我公司正在打折促销以下产品：

·MBP标签蛋白高度交联纯化树脂
编号：SY0401
英文名称：Dextrin Agarose Resin 6FF
规格：5ml
本品是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白（MBP）标签蛋白的亲和层析介质，MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了目的蛋白的活性，MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。

此外，本品以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质，具有更高的物理化学特性，可以耐受更高的压力，在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化，更适于工业大规模蛋白的纯化。

基质（Matrix）：高度交联的6%琼脂糖微球
配体（Ligand）：糊精
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞10mg MBP蛋白（80kDa）
最大压力（PressureMax）：0.3 MPa, 3bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年


RIPA裂解液(弱)厂商关键词：弱,RIPA lysis buffer (Weak),RIPA裂解液,RIPA裂解液(弱),SY0315


·SRE-GFP报告基因质粒
编号：SY0197
英文名称：SRE GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
SRE-GFP报告基因是用于检测SRF转录活性水平为目的的报告基因。三重复合体TCR/Elk1/SRF结合到SRE进行基因表达的调控。

SRE-GFP报告基因主要用于检测细胞中MAPK/ERK信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMSRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个SRE结合位点，可以高效地检测SRE的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得SRE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM SRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMSRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·植物血凝素
编号：SY0518
英文名称：Phytohaemagglutinin M(PHA-M)
规格：5mg
植物血凝素（Phytohaemagglutinin, PHA）是一种发现于植物特别是豆科植物中的凝集素（lectin），属于高分子糖蛋白类，是低聚糖（由半乳糖，N-乙酰葡糖胺和甘露糖所构成）和蛋白质的复合物，具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。PHA是由4个亚基通过非共价键结合形成的四聚体糖蛋白，包含两种亚基分子，L亚基（白细胞凝集素）和E（红细胞凝集素），因此有5种异构体，分别是L4, L3E1, L2E2, L1E3和E4。L亚基具有白细胞凝集和高促有丝分裂活性；E亚基具有高红细胞凝集和低促有丝分裂活性。

目前市场上的PHA，常以PHA-L，PHA-E，PHA-M和PHA-P等形式提供。PHA-L是纯化的L4，主要功能就是作为T淋巴细胞的刺激原，广泛用于免疫学研究（如作为INF-γ ICS、ELISPOT实验的阳性对照；或作为PBMC培养的刺激物），也可以作为顺行神经示踪剂；PHA-E则是纯化的E4，主要的用途是红细胞凝集或者糖基化修饰的研究。PHA-P是在分离和纯化PHA-L和PHA-E前PHA的蛋白质形式，PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式，两者成分相当，主要用于刺激外周单个核细胞增殖，促进某些细胞因子的产生和膜表面蛋白的表达。

本品为浅黄或灰褐色粉末，提取自红腰豆类植物，通过亲和色谱法纯化而成。

溶解和使用浓度
直接用无菌PBS或细胞培养液进行配制，并使用0.2 µm滤膜过滤。建议存储浓度为2-10 mg/ml，用来刺激淋巴增殖的推荐工作浓度2-10 µg/ml。

储存条件：2-8℃


RIPA裂解液(弱)厂商关键词：弱,RIPA lysis buffer (Weak),RIPA裂解液,RIPA裂解液(弱),SY0315

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