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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Western Blot Ladder Pen
- 库存:
736
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Western Ladder笔供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Western Ladder笔供应
产地:国产|进口
规格:1000次
品牌:百奥莱博
英文名:Western Blot Ladder Pen
蛋白免疫印迹(WB)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,经常用于检测抗体和抗原之间的特异性,而且能够对目的蛋白进行定性或定量分析研究。但是在试验中,抗原或者抗体往往都不是单一的成分,这些可能会导致在最终底片曝光出多条条带,或出现一些不明分子量的条带,或者目的条带的位置都不能确定。因此确定这些条带的分子量对我们进行下一步的分析就显得非常重要。
目前,市场上有一些预染Marker,能很好监测我们的转膜效率,电泳转膜后能在杂交膜上看到Marker相应的条带,但是这些Marker 最终不能在底片上曝出条带。
Western Blot Ladder Pen 正是要为您解决这个问题,通过转膜后对着预染Marker或经过丽春红染色确定的非预染Marker的各条带进行相应的标记,最终这些笔迹都能在目的位置曝光出相应的条带,用作分子量标准。同时也可以用它在膜上做其它标记,或者用作阳性对照。
注意事项:
1、本产品适用于HRP底物系统。
2、WB Ladder Pen使用完成后,请水平放置于2~8℃,请勿冻存于-20℃。
3、使用前请先将WB Ladder Pen在纸上画几笔之后再在膜上做相应的标记。
4、标记过程中请勿用力太大,以免破坏膜的结构,轻划即可。
5、随着笔使用时间的增加,信号可能会逐渐减弱。
操作步骤:
1、电泳的过程中,可以使用预染蛋白Marker或者非预染蛋白Marker。
2、常规的转膜后,将膜取下。
a. 使用预染蛋白Marker的NC膜:去离子水漂洗膜后,使用上下两层滤纸或者卫生 纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
b. 使用非预染蛋白Marker的NC膜:丽春红染膜后,用铅笔将非预染蛋白Marker的 各个条带标记。TBST漂洗膜,以完全去掉膜上的丽春红,使用上下两层滤纸或者 卫生纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
3、使用WB Ladder Pen在膜上做好相应的标记(轻划即可),放置15秒之后将膜放置 于封闭液中封闭。
4、按常规步骤进行后续的WB试验。
储存条件:2~8℃
欲了解更多北京现货Western Ladder笔供应的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·罗丹明山羊抗大鼠IgG(H+L)
编号:WE0374
英文名称:Goat Anti-Rat IgG, TRITC Conjugated
规格:100μl
本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,稳定性好。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
·细菌蛋白抽提试剂盒
编号:WE0261
英文名称:Bacterial Protein Extraction Kit
规格:100次
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎,有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP,Western Blot,蛋白纯化等下游操作。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| Bacterial Protein Extraction Reagent | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 1ml |
| Lysozyme(50 mg/ml) | 200μl |
| DNaseⅠ(1000U/ml) | 100μl |
保存条件:Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统,蛋白提取后的纯化操作,请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液,可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株,如果抽提效果不理想,可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况,可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。
使用方法:
细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟,收集菌体。
2、可选步骤:每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail,涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例,向菌体沉淀中加入抽提液,充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后,室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白),进行蛋白定量及下游实验。
注意:如目的蛋白以包涵体形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。
昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重,按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后,冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟,分离可溶性蛋白。
常见问题分析
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 目的蛋白不溶 | 目的蛋白表达为包涵体 | 优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液 |
| 在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I | ||
| 加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来 |
温度过低 | 将使用试剂恢复至室温 |
| Lysozyme 活性降低或失活 | 加入更多的Lysozyme 或更换新的酶 | |
| 提取物粘度高 | DNase I 活性降低或失活 | 加入更多的DNase I 或更换新的DNase I |
| 将*离子的终浓度增加至2 mM | ||
| 蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中 |
蛋白量过大 | 加入Lysozyme及DNase I |
| 蛋白抽提试剂有沉底析出 | 温度过低 | 将蛋白抽提试剂恢复至室温 |
储存条件:-20℃
北京现货Western Ladder笔供应关键词:Western Ladder笔,Western Blot Ladder Pen,WE0294
利英*克盐 Androsterone 13573-16-5
*丁酸 Carboxypeptidase B 1821-12-1
草酸*-*化*抗凝剂 100ml
ARB12433 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)血清中含量检测 Rat bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,bmpr-Ⅱ ELISA KIT
CYB163009 羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)
核酸杂交漂洗液(低张力) 500ml
ARB14046 猴γ干扰素(IFN-γ)Elisa定量检测 Monkey interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
藏红T Fluorescein disodiu*(代"m") salt 477-73-6
BL0873 羊抗鸡IgG免疫血清
BTN120644 聚乙二醇 PEG
Hanks平衡盐溶液(含酚红) 1×HBSS|5×HBSS 500ml
BL0887 兔抗豚鼠IgG免疫血清
CBZ-D-天冬*酸 Poly I 78663-07-7
聚季铵盐-10 Neomycin sulfate 68610-92-4或54351-50-7
BTN130588 小鼠抗S1标签单抗 Anti S1-Tag Mouse Mab
N-(2-乙酰*基)-亚*基二乙酸二*盐 Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodiu*(代"m") salt hydrate 41689-31-0
北京现货Western Ladder笔供应关键词:Western Ladder笔,Western Blot Ladder Pen,WE0294
FMOC-L-谷*酸5-叔丁酯 ONPG 71989-18-9
5-肌苷二磷酸三*盐 Oligo dt Cellulose 71672-86-1
58-58-2 嘌呤霉素
尿酸(UA)检测试剂盒(尿酸酶-过氧化物酶微板法) 100T
1305-62-0 Bromocresol Purple *甲*(代"酚")紫
59-23-4 D(+)Galactose D-半乳糖
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法) 100T
3-磷酸甘油酸激酶 Silver iodide 9001-83-6
B0601 山羊血清(辐照灭菌)
M0109 过氧化*(代"脲")
CBZ-D-色*酸 Colistin sulfate salt 2279-15-4
盐*(代"酸")金霉素 MR 64-72-2
PY02-121 锰盐营养琼脂 250克
α-半乳糖苷酶 SP Sephadex C-25 9025-35-8
ARB10762 人抗EB病毒抗体(EBV)酶标法分析 Human anti-epstein-barr virus antibody,ebv ELISA KIT
丁香酸 GSH 530-57-4
肌红蛋白 2,6-Dichloroindophenol 100684-32-0
醋酸白试剂 100ml
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购北京现货Western Ladder笔供应。
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文献和实验例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒)。跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象,Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因?郁闷。说明书上说混合温和是什么意思,我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好?chujun_hust :(1)“跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象”: 可能是由于你点样时,时间太长了,导致样品扩散
从寒武纪中期到石炭纪前期生有的海产化石动物。形成具有甲壳质的群体,从群体最初的胞管(剑盘)上作技状的个体发芽。个体有单胞、双胞和枝胞三种类型。有的在海底固着,有的附着在其他物体上漂浮,还有的本身有浮游器官。在黑色页岩上密集地生长,构成特有的生物区。进化速度快,在进化的对比上是很重要的。在分类上的地位长期不能确定,虽然多数人认为是腔肠动物,但以 R. Kozlowski( 1947)等人为代表的认为是肠鳃类,看来具有更大的说服力。
豆科笔花豆属的一个种,学名Stylosanthes humilis H.B.K.或S.sundaica Taub.。 一年生草本植物。原产中美洲和巴西。广泛分布于热带、亚热带地区。1964年引入中国广东、广西等地试种。 主根深,侧根少。茎直立或伏卧,多分枝,草层高45-60cm。三出复叶,短穗状花序,花小,黄色。荚果黑褐色,每荚一粒种子,棕褐色。每千克39.6万~48.4万粒。喜热带潮湿一干旱气候。适生于年平均温度21~26℃,最低月平均温8-15℃,年降雨
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