PBS-Triton去污剂

免疫组化难题集锦

1、在什么情况下使用TritonX-100？（1）Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织化学(>10um厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂，在膜上打孔。（2）其作用原理：Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内，故在细胞免疫组化时尤为推荐使用，这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。（3)Triton X-100既是一种表面活性剂，也有抗

如何提高 HIS 标签蛋白纯化效果

作用。 建议 加非离子型去污剂到洗脱缓冲液（如：2% Triton X-100）或增加 NaCl 的浓度洗脱。   是不是很有收获，快去试试吧！

免疫共沉淀实验指南

制成50％ 悬液。 每 1mL 细胞裂解液上清加入 100 µL Agarose protein A+G 珠子，4℃ 振荡 10 min，进行预清除。 4℃，10000 rpm 离心10 min移去 Agarose protein A+G 珠子，转移上清至一新离心管中。 用 Bradford 法（考马斯亮蓝染色法）测定上清蛋白浓度。（应至少将细胞裂解液作 1:10 稀释后再测定，这是因为存在于裂解液中的去污剂成分会干扰考马斯亮蓝的作用）。 根据所测得的细胞裂解液蛋白浓度，用 PBS