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- 技术资料
- 保存条件:
-30℃至-15℃
- 保质期:
2 年
- 英文名:
InRcute IncRNA qPCR Kit(SYBR Green)
- 供应商:
天根生化科技(北京)有限公司
- 规格:
20 μl×500 次
与 mRNA 相比,lncRNA 具有丰度低、GC含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统定量试剂对 lncRNA 难以达到理想的效果。本试剂盒中的 2×lnR lncRNA PreMix 是专门为 lncRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量 PCR 检测试剂,其中的DNA Polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式,确保本产品在保证较高的反应特异性的情况下具有更高的检测灵敏度。此外,Buffer 中添加了的 H-competitor 因子和 EP 组分,使得本产品具有广泛的样本普适性,对不同GC含量的模板、具有复杂高级结构的模板、PCR 抑制剂残留较多的模板以及长片段模板等具有非常好的扩增适用性,特别适合高级结构相对复杂,整体丰度相对较低的 lncRNA 的定量检测。
■ 高灵敏的抗体修饰聚合酶,适用快速定量流程,高效完成 lncRNA 检测
■ H-Competitor 因子竞争氢键,完美解决高 GC 和复杂IncRNA模板
■ EP PCR 组分稳定体系,有效的保护酶活,抵御各种抑制剂的干扰
特别适用于在各类荧光定量仪器上采用 SYBR Green 法进行lncRNA GC 表达分析的实验,也适合高 、复杂二级结构、杂质残留量高及长片段 cDNA 模板定量时使用。
实验结果

提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402及国外A 公司提供的解决方案( 使用mRNA 反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。
结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于A 公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。

分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于B 公司的mRNA 通用试剂。
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- 内容
- 询问日期
文献和实验[1] Mao J, Wei S, Chen Y, et al. The proposed role of MSL-lncRNAs in causing sex lability of female poplars[J]. Horticulture Research, 2023, 10(5): uhad042.
[2] Luo Q, Kuang Y, Tao X, et al. Pan-cancer analysis of PCAT6 and its effect on oesophageal squamous cell carcinoma cell proliferation and migration[J]. Medical Oncology, 2023, 40(4): 125.
REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度,需要摸索,从200nM到700nm等,设置不同浓度。3、每个引物浓度,从well 1到12设置4个样本,阳性cDNA 1和2,NTC以及H2O,做triplicate。4、若用ABI7000或7700,所有的PCR条件可设置成一致的,减少麻烦,当然,引物
miRNA 是一种既可爱又可恨的小东西,它们深居简出,它们飘忽不定,它们似乎总是在和我们捉迷藏,当我们费尽力气以为即将要将它们掌控的时候,它却又顽皮的从我们的指缝中溜走,而我们却又毫无办法。同学莫怕,TIANGEN 即将上市的最新产品 miRcute 增强型 miRNA cDNA 第一链合成试剂盒(KR211)与 miRcute 增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)(FP411)这对黄金搭档轻松解决所有问题,反转加A一步完成,高灵敏度检测试剂让低丰度miRNA清晰
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