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- 保存条件:
2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Adipose Differentiation Related Protein (ADRP)
- 库存:
20
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
盒
产品名称:ADRP重组蛋白
英文名称:Recombinant Adipose Differentiation Related Protein (ADRP)
英文简称:PLIN2; ADFP; Adipophilin; Perilipin 2
物种:(Human,人);(Mouse,小鼠); (Rat,大鼠)等其它种属。
来源:原核表达
宿主:E.coli
性状:冻干粉
规格:10µg/50µg/200µg/1mg/1g
储存:避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,请参见活性蛋白。
ADRP重组蛋白表达系统有以下三类,各有的特点:
| 原核表达系统 | 真核表达系统 | 无细胞表达系统 |
| 原核主要是大肠杆菌表达系统,方便,便宜,周期短,但有些蛋白会折叠不好,不带有糖基化等修饰。 | 真核包括酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统等。一般能正确折叠,含有各种修饰。但价格高,周期长。 | 无细胞系统一般要靠公司来做,价格高。 |
| 表达系统 | 系统优缺点 | 系统蛋白表达方式 | 优点 | 缺点 | |
| 真核表达系统 |
哺乳动物细胞 |
表达的蛋白活性高,能够表达多复杂修饰 的蛋白;需要细胞房,无菌,成本投入高 |
瞬时转染 |
能够快速灵活的制备活性蛋白 | 蛋白表达量低,大量生产成本极高 |
| 稳定细胞系构建 |
筛选出的细胞株能够实验蛋白的大量生产 | 细胞株筛选困难且时间长,投入大 | |||
| 重组抗体表达 |
比普通单抗生产量有保证 | 需筛选细胞株,需耗时耗力 | |||
| 酵母表达系统 | 与哺乳动物相比只能表达简单修饰的蛋白 | 毕赤酵母表达 | 甲醇诱导操作方面 | 需要时间 | |
| 酿酒酵母表达 | 不常用 | 不常用 | |||
| 昆虫表达系统 | 不常用 | ||||
| 原核蛋白表达系统 | 大肠杆菌表达 | 操作简单。表达量高; 易形成包涵体,蛋白活性物保证 |
|||
| 枯草芽 孢杆菌表达 |
不常用 |
||||
| 链霉菌 | 不常用 | ||||
1,可能难以表达、蛋白不会被修饰、可能产生包涵体
2、同:都是磷酸化,有能量产生。异:氧化磷酸化要分解自身的有机物,光和磷酸化合成有机物
ADRP重组蛋白纯化方法---提取:
- 固液萃取 在固液萃取中,提取物是由固相转为液相,或由细胞内转为细胞外,其提取效率与物质的扩散作用有关。 为了增加扩散物质的量,也就是提高提取速度,常采用如下措施: 1)提高材料的破碎程度,以增加扩散面积,减少扩散距离; 2)进行搅拌,使已扩散的溶质迅速与溶剂混匀,以保持两项界面最大浓度差,或分多次提取,不断更换新鲜溶剂,以提高扩散速率; 3)延长提取时间,提高提取 关键词:[萃取 蛋白质 细胞 核酸 精蛋白。
蛋白质有多种分类方法:
1) 按其功能 活性蛋白和非活性蛋白
2) 按其结构 简单蛋白和结合蛋白
3)按其溶解度 水溶性蛋白、醇溶蛋白、硬蛋白(不溶于水、稀酸、稀碱和有机溶剂,遇强酸或强碱溶解)。一般来说,大部分蛋白可溶于水、稀酸、稀碱或稀盐溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂。
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文献和实验近年来,重组蛋白的应用有了显著增长,与此同时,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化最普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白
(1)复性效率低。传统的复性方法稀释法和透析法。稀释复性法对样品几十倍,甚至上百倍的稀释会使样品的体积急剧增大,给后续的分离纯化带来很大的困难,而且复性过程中需要较大的复性容器。透析法耗时较长,而且要多次更换透析溶液。这两种方法的共同缺点是蛋白质在复性过程中会发生聚集而产生大量沉淀,复性效率低,通常蛋白质的活性回收率只有5~20%,而且复性后的蛋白质溶液中含有大量的杂蛋白,需要进行进一步的分离纯化。 (2)工艺路线烦琐,生产周期长。在传统的重组蛋白质分离纯化工艺中,大多采用经典的软
酵母菌,实际上是一些单细胞真菌的统称,在自然界中分布广泛。其中有很多种属已被成功用于外源基因的表达和研究。它不仅集合了原核表达系统培养方便、经济实用、易于大规模发酵等优点,而且还具备真核表达系统蛋白翻译后修饰的功能。今天AtaGenix这位老司机将带你熟悉我们拥有的酿酒酵母和毕赤酵母两套蛋白表达系统,让你在重组蛋白的道路上越走越远。 1 酿酒酵母 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),在传统工艺中是面包师和酿酒
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