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动物实验
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第一部分 疾病动物模型
一、肿瘤动物模型
根据肿瘤动物模型的制备方法或者来源分为三大类
1.自发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理较接近人。
缺点：数量及种类非常有限，无法满足实验的需要。
2.诱发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理也较接近人。
缺点：几乎所有诱发剂对人体都有很大的毒性，对实验人员存在较大的风险；实验周期非常长，且诱发成功的时间不一致，无法在同一条件下大批量实验。
3.移植性肿瘤动物模型
优点：可以在同一条件下大批量移植，实验周期较短，对动物的治病机制亦与人类相似，已成为目前应用最为广泛的造模方法。
| 模型类型 | 移植部位 | 细胞类别 |
| 肺癌 | 肺脏、皮下 | |
| 胰腺癌 | 胰腺、脾脏、皮下 | |
| 结肠癌 | 结肠壁皮下 | |
| 肝癌 | 门静脉、肝脏、皮下 | |
| 胃癌 | 胃体、皮下、腹腔 | |
| 直肠癌 | 直肠壁、皮下 | |
| 乳腺癌 | 乳腺、皮下 | |
| 肾癌 | 肾实质、肾被膜、皮下 | |
| 膀胱癌 | 膀胱壁、皮下 | |
| 黑色素瘤 | 皮下 | |
| 多发性骨髓瘤 | 骨髓腔、血管内、皮下 |
二、其它疾病动物模型
| 模型种类 | |
| 糖尿病 | 1.自发性 动物自然发生的疾病, 与人类某种疾病有相似之处 ,或通过遗传育种培养而保留下来的疾病动物。db /db 小鼠由 C57BL KsJ 近亲交配株常染色体隐性遗传衍化而来 ,属 2 型糖尿病模 型。一个月时开始贪食及发胖, 继而产生高 血糖、高血胰岛素, 胰高血糖素也升高。 2.诱发性 通过化学药物特异性破坏胰岛β 细胞，最常用的药物有链脲佐菌素和四氧嘧啶，具有造模 稳定,快速。 |
| 肝损伤 | 导致的肝损伤主要有化学性肝损伤、药 物性肝损伤、免疫性肝损伤和酒精性肝损伤等类 型，其临床表现为肝坏死、脂肪肝、肝纤维化、肝硬 化以及肝癌等。 1.化学性 常用化学性肝毒物质有四氯化碳 （CCl4 ）、氨基半乳糖（D-gal）、硫代乙酰胺、黄曲霉 素等。 2.药物性 对乙酰氨基酚、异烟肼、环孢素 A、四环素和雷公藤等。 3.免疫性 卡介苗（BCG）加脂多糖（LPS）诱导法，刀豆蛋白 A（ConA）诱导法。 4.酒精性 动物过量饮酒可造成 肝脏不同程度的损害，轻度发展为脂 肪肝、肝纤维化 ,重度可发展为肝硬变或肝细胞癌。 |
| 脂肪肝 | 脂肪肝成为国内高发疾病， 普通人群的发病率约为 10%左右， 已出现逐年升高的趋势。目前最常用的方法是高脂饮食，该方法简便、 重复性好、 价格低廉、 动物死亡 率低、 复制率高。 |
| 乙肝 | 通过显微注射法将HBV 基因组注入核内，建立血清中可稳定复制和表达 HBsAg 的 HBV 转基因小 鼠 。可用于开展抗病毒药物和乙 肝发病机制的研究工作。 |
| 脊髓损伤 | 脊髓损伤是一种致残率很高的疾 病, 给家庭、社会均带来沉重的负担。 随着工业、建筑业和交通 运输的飞速发展, 脊髓损伤患者数量呈逐年上升趋势。常用的造模方法有以下几种： 1）脊髓撞击伤模型 2）脊髓压迫伤模型 3）脊髓横断损伤 4）脊髓牵拉损伤模型 5）脊髓缺血性损伤 |
| 脑中风 | 脑中风是又称脑血管意外，是世界上最重要的致死性疾病之一。以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，具有极高的病死率和致残率，主要分为出血性脑中风和缺血性脑中风，以脑梗塞最为常见。 1.缺血性 线栓法、开颅电凝法、光化学法、微栓子栓塞法、去除大鼠脑左侧皮层血管法 2.出血性 自体血注入法、自发性、胶原酶注入法 |
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文献和实验癌症已经成为影响人类健康的重要疾病，发病率呈现逐年上升趋势，癌症研究领域中公认的缺陷之一是缺乏能够研究癌变和癌症治疗的模型系统。在过去的几十年中，抗肿瘤治疗药物的研发呈现爆炸式的增长，但是绝大多数新疗法都不能顺利通过III期临床试验，其主要原因就是缺乏合适的体内模型。我们常用的人类肿瘤细胞系或患者源性肿瘤移植到免疫缺陷小鼠体内的肿瘤动物模型，使用人类肿瘤细胞系建立的动物模型称作肿瘤细胞系异种移植模型（Cancer cell line-based xenograft , CDX），而使
（1）收集 将对数生长的肿瘤细胞收集 ， 用无血清基质 10.0ml， 于 1500 转/ 分， 离心3min， 连续洗 3 次， 最后用无血清基质混匀。（2）计算用血球计数器计算肿瘤细胞数量( 平均 5 个中方格的细胞计数×104即是肿瘤数/ 毫升) 。（3）接种计算完肿瘤细胞总数， 再将肿瘤细胞密度调至 4×106 个/ml， 每只小鼠腋下接种 50ul(即 2×105个肿瘤细胞)， 2周左右可扪及肿瘤小节结。一般选取 6-8 周的小鼠，不同的肿瘤细胞接种的数量和动物不一
目前临床所用的抗肿瘤药中，大多数是经动物移植性肿瘤试验筛选而发现的。应用动物移植性肿瘤筛选药物的优点是：使一群动物同时接种同样量的瘤细胞，生长速率比较一致，个体差异较小，接种成活率近100%，对宿主的影响相类似，易于客观判断疗效，可在同种或同品系动物中连续移植，长期保留供试验用，试验周期一般均较短，试验条件易于控制等。因此目前抗肿瘤药筛选大多数采用动物移植瘤作为筛选模型。目前世界上保存的动物移植肿瘤约有400株，但筛选试验常用者仅20～30种。据1984年统计，我国在同系、同种
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