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文献和实验蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
! 我也做过小分子量的蛋白,大概是15kD左右吧,我没有三抗,我自己的经验是: 1. 电泳的时间一定不要太长,我把积层胶制的很厚,分离胶比平常的要短一些,我用的是15%的分离胶,大概跑了2/3分离胶左右的时候就停了; 2. 转膜我们是湿转,时间我控制在6小时左右,恒压25-27V左右; 3. 小分子量蛋白有时候会被marker的不准确而影响判断,我一般是用两种不一样的marker加在两边,来综合判断分子量,这样更准确;
的必要条件之一。 总体来说,蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。以下是关于蛋白分子量标准的小叙: 一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准 未染色的蛋白分子量标准是最简单,也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是精确判断蛋白大小必须的。现在的Marker多数都选用预混和的Marker,方便不同大小的蛋白比较。预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示,因为混合









