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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
PPARγ luciferase reporter plasmid
- 库存:
763
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存
编号:SY0069
品牌:百奥莱博
规格:1μg
产地:国产|进口
英文名:PPARγ luciferase reporter plasmid
PPARγ荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(PPARγ uciferase reporter plasimd)是用于检测PPARγ转录活性水平为目的的报告基因。PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)是调节靶基因表达的核内受体转录因子超家族成员,可分为α、β和γ三种类型。其中PPARγ主要表达于脂肪组织及免疫系统,与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛系统抵抗关系密切。
PPARγ报告基因主要用于检测细胞中PPARγ的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMPPARγ-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个PPARγ结合位点,可以高灵敏度地检测PPARγ的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得PPARγ报告基因更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMPPARγ-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
想要了解更多关于PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·*黄绿素,超纯级
编号:SY0556
英文名称:Calcein, AM, Ultrapure Grade
规格:1×50μg
*黄绿素Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,发绿色荧光(Ex=490 nm,Em=515 nm)。 因其在传统的Calcein(*黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团,增加了疏水性,使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM细胞毒性极低,是最适合用于活细胞染色的荧光探针,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶,Calcein, AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。作为核染色染料的碘化丙啶不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定 Calcein, AM 和 PI的合适浓度。
本品为粉末形式提供的Calcein-AM,超纯级别(≥95%),可与碘化丙啶(PI)(SY0491)联合使用,用于活细胞和死细胞的同时检测。或者直接购买我司提供的Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒(SY0501)。
中文名称:3-O-乙酰胺-2,7-二(羧乙基)-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯;*黄绿素乙酰甲酯;
英文名称:3,6-Di(O-acetyl)-4,5-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester
CAS:148504-34-1
分子式:C46H46N2O23
分子量:994.86
纯度:≥95%(HPLC)
Ex/ Em(nm):490/515
储存条件:-20℃避光干燥,有效期12个月。
结构式

注意事项
1)对于微量试剂,开封前,请稍微离心一下,以保证粉末落入管底。
2)由于Calcein-AM对湿度非常敏感,本粉末保存的过程中一定要保持干燥。对于配制好的Calcein-AM储存液需要分装冻存,且必须紧紧密封盖子,干燥保存。Calcein-AM工作液必须现配现用。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存关键词:SY0069,PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒,PPARγ luciferase reporter plasmid
4-*乙酰**(代"胺") Hematin 539-03-7
RN1201 PLANTeasy 植物RNA提取试剂
ARB11324 人胆酸(CA)酶免分析 Human cholic acid,ca ELISA KIT
ARB12696 大鼠凝溶胶蛋白(GelsolIn)Elisa定量检测 Rat gelsolin ELISA KIT
F010107 小鼠抗A型流感M2e抗体 Monoclonal MouseAnti-influenzavirus(M2e)
ARB13713 兔骨桥素(OPN)尿液中含量检测 Rabbit osteopontin,opn ELISA KIT
PY02-128A 普通琼脂斜面培养基(pH8.0-8.2) 250克
9003-39-8 聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮40000 PVP40000
ARB10743 人纤溶酶原(Plg)含量测试 Human plasminogen,plg ELISA KIT
对**甘*酸 LVFX 6212-33-5
ARB11472 人胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)含量检测 Human insulin-like growth factors 1 receptor,igf-1r ELISA KIT
SJ0610 UDP Na2 5-二磷酸尿苷二*
ARB12919 小鼠白细胞介素35(IL-35)elisa检测说明书 Mouse interleukin 35,IL-35 ELISA KIT
霉酚酸 CTX 24280-93-1
ARB12354 大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)含量分析 Rat pregnancy associated plasma protein a,papp-a ELISA KIT
BL1238 SOC液体培养基(干粉)
PY01-016 脱氧胆酸* 25克
BTN100937 φ29 DNA聚合酶 φ29 DNA Polymerase
F030103 HRP标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*HRP
73049-73-7 蛋白胨
ARB13528 兔p53(p53)含量分析 Rabbit p53/tumor protein,p53/tp53 ELISA KIT
PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存关键词:SY0069,PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒,PPARγ luciferase reporter plasmid
·细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒
编号:SY0326
英文名称:Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
规格:50T
细胞核蛋白、细胞浆蛋白在细胞研究和蛋白质组学中具有重要意义,因此在体外研究中需要将其从细胞或组织中分离。本试剂盒提供了一种较为简单方便,高效的蛋白抽提方法,其原理是:通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀,然后破坏细胞膜,释放出细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂C抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒1次可对2×106个细胞和30-50mg组织样品进行抽提,按照该使用量,SY0326可抽提50个样品。
产品组份:
胞浆蛋白抽提试剂A————10ml
胞浆蛋白抽提试剂B————0.5ml
胞核蛋白抽提试剂————2.5ml
储存条件:-20℃,有效期一年。
使用方法
将试剂盒各组分溶解后立即放置在冰上,混匀。取适量的胞浆蛋白抽提试剂A(以下统称:试剂A)和胞核蛋白抽提试剂(以下统称:试剂C)备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
1 细胞样品蛋白的抽提
1)细胞处理
对于贴壁细胞:PBS清洗细胞1次,EDTA溶液消化细胞或用细胞刮子刮下细胞,并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞,尽量吸尽上清,留下细胞沉淀备用。
【注】:尽量避免用胰酶消化细胞,以免胰酶降解抽提的目的蛋白。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,PBS清洗细胞1次,收集细胞,尽量吸尽上清,留细胞沉淀备用。
2) 每20µl细胞沉淀加入200µl含PMSF的试剂A。
【注】:对于2×106个Hela细胞,其细胞沉淀的体积大约为20µl或40mg。
3) 最高速剧烈涡旋5s,完全悬浮分散细胞沉淀。
【注】:如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开,可以适当延长旋涡震荡的时间。
4) 冰浴10-15min。
5) 加入胞浆蛋白抽提试剂B(以下统称:试剂B) 10µl。最高速剧烈涡旋5s,冰浴1min。
6) 最高速剧涡旋5s,4℃12,000-16,000g离心5min。
7) 立即吸取上清至一预冷的塑料管中,上清即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用,也可以冻存备用。
【注】:此步千万不要触及沉淀,可以在沉淀上方保留极小体积的上清,以免吸到沉淀。
8) 对于沉淀,完全吸尽残余上清,加入50µl含PMSF的试剂C。
【注】:此步需完全吸尽上清,否则会带来细胞浆蛋白的污染。
9) 最高速剧烈涡旋15-30s,把沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中,每隔1-2min再高速剧烈涡旋15-30s,共30min。10)4℃ 12,000-16,000g离心10min。
11)立即吸取上清至一预冷的塑料管中,即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用,也可以-70℃冻存备用。
2 组织样品的抽提
1) 将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B,并加入PMSF至最终浓度为1mM,混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200µl组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液,并在玻璃匀浆器内充分匀浆。
【注】:匀浆需在冰浴或4℃进行。
2) 匀浆后将匀浆液转移至塑料离心管内,冰浴放置15min。
3) 4℃ 1,500g离心5min。把上清转移至一预冷的塑料管中,上清含部分细胞浆蛋白。
【注】:吸上清时千万不要触及沉淀。
4) 对于上述收集得到的沉淀,已经充分匀浆,但很多细胞仍没有破碎。接下来请参照【细胞样品蛋白抽提】的步骤2)开始操作,即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作,即可得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤【组织样品抽提】中步骤3)抽提得到的细胞浆蛋白合并备用。
我公司正在优惠促销报告基因检测等系列产品,期待您的咨询选购PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒库存。
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文献和实验【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题?
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒,但是我不知道两种质粒间的比例是多少,有哪位前辈做过这方面实验的,请帮我指点一下,谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL-TK(海蜃素荧光素酶)的荧光值要高一些,我转20ng/孔(24孔板),作为内参.pGL3(萤火虫荧光素酶)的荧光值低一些,我转0.4ug/孔(24孔板)然后0.4ug的调整质粒。这样的话,萤火虫荧光素酶
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