SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销
编号：SY0095
规格：1μg
英文名：AhR luciferase reporter plasmid
AhR荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（AhR luciferase reporter plasimd）是用于检测AhR转录活性水平为目的的报告基因。芳香族化合物受体(Aryl
hydrocarbon receptor, AhR)是一个核受体转录因子。AhR广泛地参与多种细胞内的信号通路,包括核受体信号通路,缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)信号通路,p53信号通
路以及细胞周期信号通路等。AhR通过对细胞内不同信号通路的调节作用从而影响了细胞的生长,增殖以及分化等过程。另外,AhR与癌症的发生和发展也密切相关,在许多的肿瘤细胞中都
发现了AhR的异常表达。

AhR报告基因主要用于检测细胞中AhR的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表性分析等。

pGMAhR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AhR结合位点，可以高灵敏度地检测AhR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结
合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得AhR报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMAhR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

关于SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·C/EBPβ-GFP报告基因质粒
编号：SY0209
英文名称：C/EBPβ GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
C/EBPβ-GFP报告基因是用于检测C/EBPβ转录活性水平为目的的报告基因。C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding protein beta)是转录因子C/EBPs家族的重要成员，它主要通过对靶细胞基因转录的调节，参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、细胞周期调控等。

C/EBPβ-GFP报告基因主要用于检测细胞中C/EBP信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMC/EBPβ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个C/EBPβ结合位点，可以高效地检测C/EBPβ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得C/EBPβ-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM C/EBPβ-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMC/EBPβ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·ATF6-GFP报告基因质粒
编号：SY0185
英文名称：ATF6 GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
ATF6-GFP报告基因是用于检测ATF6转录活性水平为目的的报告基因。ATF6(Activating Transcription Factor 6)是一种内质网应激调节时的跨膜转录因子。内质网中错误折叠蛋白的积累将导致ATF6的溶蛋白性裂解。胞质部分的ATF6进入细胞核作为转录因子引起ER chaperones的转录。ATF6的激活将预示着多种疾病的发生，例如：心肌梗塞、动脉粥样硬化和神经退化疾病等。

ATF6-GFP报告基因主要用于检测细胞中ATF6信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMATF6-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ATF6结合位点，可以高效地检测ATF6的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ATF6-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ATF6 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMATF6-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销关键词：AhR luciferase reporter plasmid,AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒,SY0095


·dNTP混合溶液(2.5 mM each)
编号：SY0046
英文名称：dNTP Mix (2.5 mM each)
规格：1ml
dNTP Mix为dATP、dCTP、dGTP和dTTP的预混溶液，各自的浓度为2.5mM，适合用于PCR扩增、real-time PCR、cDNA或普通DNA合成、DNA测序和标记等各种常规分子生物学实验。

dNTP Mix用超纯水配制，并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0，纯度≥99%（HPLC）。经检测，不含DNase、RNase、phosphatase。可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。

注意事项
1)可以室温溶解，溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)避免反复冻融，初次溶解后可以分装成小份使用。

储存条件：-20℃。


SY0095型AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒促销关键词：AhR luciferase reporter plasmid,AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒,SY0095


·双链DNA(dsDNA)定量试剂
编号：SY0259
英文名称：Picogreen dsDNA Quantitation Reagent
规格：100μl
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义。疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

常用的检测核酸的方法有:
1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；
2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；
3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：
①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；
②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；
③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

若每次分析体积为2 mL，1ml Picogreen定量试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则足够2000次分析。另外，我公司提供【双链DNA（dsDNA）定量检测试剂盒】方便客户选用。

储存条件：4℃避光干燥，有效期6个月。

注意事项
1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。

应用实例
【注】：本方法参照2010《中国药典》进行操作的，如结果要求不是特别严格，可参照Yeasen 【双链DNA（dsDNA）定量检测试剂盒（Cat#10225）】的标曲制备方法。

1、染料工作液的配置

PicoGreen dsDNA定量试剂取出后回温至室温，该试剂是以1mL的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天，根据实验用量用1×TE（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH7.5）按1:200 的比例稀释PicoGreen浓缩液。如，要准备足够的操作溶液测定20个样品，可在19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】：
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

2、标准品工作液的配制

小牛胸腺嘧啶DNA干粉 1mg（Tris，Nacl等浓度已成标准体系），加入1mL无菌去离子水（无Dnase），配制成1mg∕mL的标准品工作液。
【注】：标准品也可用λDNA或其他已知浓度的纯化DNA。

3、标准品工作液稀释

1）母液稀释：取10µl（1mg∕mL）标准品工作液加入到990ul TE溶液中，浓度稀释成10µg∕mL，取10µl（10µg∕mL）标准品工作液加入到990µl TE溶液中，浓度稀释成100ng∕mL；
2）倍比稀释：取800µl （100ng∕mL）的标准品工作液加入到200µl TE溶液中，浓度达到80ng∕mL，取500µl（80ng∕mL）的标准品工作液加入到500µl TE溶液中，浓度稀释到40ng∕mL；依次倍比稀释，配成20ng/ml、10ng/ml、5.0ng/ml、2.5ng/ml、1.25ng/ml、0.625ng/ml的标准品溶液；
3）标准曲线的制备：倍比稀释后的各梯度标准品溶液和染料工作液各取100µl混匀，避光室温放置5min。使用FB-15型便携式荧光仪检测样品的荧光值：将混合后的溶液加入微量比色皿，确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。以1×TE缓冲液为blank，测定样品和空白对照的荧光值；用标准品溶液的浓度（ng/ml）对应的荧光强度作直线回归，制备标准曲线。
4）测量剩余样品的荧光值。荧光计将给出一个直接的浓度读数，数据可以用来产生DNA 浓度的标准曲线。

4、结果分析


表1 标曲测定荧光值


图1 标准曲线图

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