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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
辛基-b-D-硫代吡喃葡萄糖苷
- 库存:
14
- 供应商:
柯雷生物
- CAS号:
85618-21-9
- 规格:
超纯,98%
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文献和实验膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 方法
的方法可能不能直接应用在其他材料上,但这些方法可以为读者在进行其他材料的实验过程中提供优化指导。 2. 材料 ( 1 ) 分离缓冲液:5 mmol/L BTP-MES ( pH 7. 5 );0.2 mol/L 碘化钾, 1 mmol/L Na2EDTA,0.3 mol/L 甘露醇, 20% ( m/m) 甘油,5 mmol/L 二硫苏糖醇(DTT ) ,0.5% (V/V) 蛋白酶抑制剂混合物(Sigma 公司)和 15 mmol/L n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷
的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说,我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析,随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13,24,25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基:含 100 μg/ml 氨苄青霉素,15 μg/ml 卡那霉素,2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液:300 mmol
A液(HEPES贮存液):称取23.83g HEPES溶于80ml双蒸水,用1mol/L NaOH调至pH 6.8(不能用HCl),用双蒸水补充至终体积100ml即为1mol/L HEPES贮存液。4℃保存。 B液(阿拉伯胶):称取50g阿拉伯胶粉(gum arabic)加入250ml烧杯中,加100ml双蒸水,室温下搅拌1~2天,用4层纱布过滤后按5ml/管分装人15ml塑料离心管内,-20℃保存。 C液(还原剂):称取10mg没食子酸正丙酯(n
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