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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
-20℃
- 克隆性:
Polyclonal
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig........
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, ELISA, IHC, IHC-P, IHC-F, IF......
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体英文名:
CHIA
- 抗体名:
哺乳动物酸性几丁质酶抗体
- 规格:
50ul/100ul/200ul
多克隆抗体与单克隆抗体的区别
多克隆抗体
特点:
- 识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
- 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
- 通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
- 制备成本低廉且制备速度较快。
- 制备过程比单克隆抗体简单。
优点:
- 高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。
- 可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。
- 与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
- 可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。
- 通常是检测变性蛋白质的首选。
- 多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:
- 易产生批次间差异。
- 产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
- 由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
- 不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。
单克隆抗体
特点:
- 易产生批次间差异。
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文献和实验和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性,会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理,酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合(前文也曾提到,此系统的耐受pH范围为4-10)。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意
十分重要,因其不仅影响蛋白的表达,而且也影响随后的纯化过程。除耐受缓冲液条件有限外,当选择宿主表达系统时,His-tag 也有一些局限。 His-tag 大肠杆菌表达系统中较为有利,但实际情况下对于酵母,哺乳动物和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag 系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基 pH 通常为酸性,会干扰 His-标签蛋白与 IMAC 纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争 His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep
哺乳动物表达系统是适用于生成具有天然结构和活性的哺乳动物蛋白的首选表达平台,可以实现最高水平的翻译后加工,使蛋白质获得最佳功能活性,适合在最类似生理学的环境中研究特定蛋白质的功能。它常用于抗体和治疗性蛋白质以及人类功能细胞分析的蛋白质表达。 和稳定表达相比,哺乳动物瞬时表达系统可实现灵活且快速的蛋白质生产,可以在 1-2 周内生成大量蛋白质,适用于人或其他哺乳动物蛋白的表达,和大肠杆菌、酵母或昆虫细胞等宿主表达系统相比,可实现更天然的折叠和翻译后修饰——包括糖基化(图 1)。 图 1、哺乳动物
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