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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
-20℃
- 克隆性:
Polyclonal
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig........
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, ELISA, IHC, IHC-P, IHC-F, IF......
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体英文名:
PPP2R2B/PP2A-B55
- 抗体名:
蛋白质磷酸酶2A-B55抗体
- 规格:
50ul/100ul/200ul
多克隆抗体与单克隆抗体的区别
多克隆抗体
特点:
- 识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
- 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
- 通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
- 制备成本低廉且制备速度较快。
- 制备过程比单克隆抗体简单。
优点:
- 高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。
- 可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。
- 与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
- 可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。
- 通常是检测变性蛋白质的首选。
- 多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:
- 易产生批次间差异。
- 产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
- 由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
- 不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。
单克隆抗体
特点:
- 易产生批次间差异。
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文献和实验组是动态的,随着大量刺激的变化而变化,翻译后修饰常用于调节细胞活性。PTM 发生在不同的氨基酸侧链或肽键上,它们通常由酶活性介导。事实上,据估计,5% 的蛋白质组包含 200 多种类型翻译后修饰的酶。这些酶包括激酶、磷酸酶、转移酶和连接酶,它们在氨基酸侧链上添加或移除功能组、蛋白质、脂质或糖;以及蛋白酶,它们切割肽键以移除特定序列或调节亚基。许多蛋白质也可以利用自催化结构域,如自激酶和自蛋白分解结构域进行自我修饰。翻译后修饰可以发生在蛋白质生命周期的任何阶段。例如,许多蛋白质在翻译完成后不久就被修饰
蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)
【实验目的】 了解蛋白质印迹法的基本原理及其操作和应用。 【实验原理】 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法,这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。待测蛋白既可以是粗提物也可以经过一定的分离和纯化,另外这项技术的应用需要利用待测蛋白的单克隆或多克隆抗体进行识别。 如图所示,可溶性抗原,也就是待测蛋白首先要根据其性质,如分子量,分子大小,电荷以及其等电点等采用不同的电泳方法进行
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
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