快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料)供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料)供应
规格：5ml
编号：WE0153
英文名：Fast TaqMan Mixture(High ROX)
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+等，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase，能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活仅需在95℃孵育30s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟，大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与快速热启动酶的组合，有效抑制了非特异产物的产生，并显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，线性范围更宽。该产品适用范围广，可用于普通和快速定量PCR程序。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0151)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0152)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0153)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

试剂盒组成：

 

组份	WE0151-5ml	WE0152-5ml	WE0153-5ml
2×Fast TaqMan Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Fast TaqMan Mixture(With ROX)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)所用探针的终浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序：
建议采用两步法PCR反应程序，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	30 s
变性	95℃	5 s	35-40 个循环
退火/延伸	60℃	30 s

注意：
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、30s条件下实现酶的活化。在此条件下，大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板，可将预变性时间延长至1-4分钟，以使起始模板充分解链。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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去*抗坏血酸 Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH 490-83-5
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·抗GST标签单克隆抗体
编号：WE0352
英文名称：Anti GST-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体，与GST结构域具有高亲和性，可灵敏特异地检测各种GST编码载体表达的GST-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(1：200-20000)

·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)
编号：WE0241
英文名称：NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
规格：24次|96次
  本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer，专为illumina平台建库设计，index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要，制备的文库可用于Illumina GAIIx，HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。

试剂盒组成：

组份	24次	96次
Adaptor for Illumina	60μl	240μl
Universal Primer for Illumina	30μl	120μl
Index 1– 12 Primers for Illumina	12×10 μ l	12×20 μ l

自备仪器、试剂和耗材：
1、磁力架：建议使用DynaMagTM-2(货号： 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒：建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号： WE0205)。
3、DNA建库试剂盒：建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号： WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管：建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管；枪头：建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、Adaptor为双链结构，请勿将其置于室温温度以上，以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心，使液体收集到管底，以免不同引物间交叉污染。

使用流程


操作步骤：

百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。

Adaptor for Illumina：
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina：
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 1–12 Primers for Illumina：

	Index Primers for Illumina	Index
Index 1 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATCACG
Index 2 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CGATGT
Index 3 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TTAGGC
Index 4 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TGACCA
Index 5 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACAGTG
Index 6 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GCCAAT
Index 7 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CAGATC
Index 8 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACTTGA
Index 9 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GATCAG
Index 10 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TAGCTT
Index 11 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GGCTAC
Index 12 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CTTGTA

储存条件：-20℃


快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料)供应关键词：Fast TaqMan Mixture(High ROX),高含量ROX校正染料,荧光探针,快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料),WE0153

7647-17-8 Cesium choride(CsCl)   *化铯
2-(7-偶氮*并三氮唑)-N,N,N",N"-四甲基脲六*磷酸酯 Bibenzyl 148893-10-1
SJ0802 Melibiose  密二糖
PY04-045  复达欣/头孢他啶  0.8mg/支×10支  每支添加于100mlPALCAM培养基基础中，用于李斯特氏菌的选择性分离培养
C0301 优级新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
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BTN80201 一步法无内毒素质粒DNAOUT One-Step Endo-free Plasmid DNAOUT
吩嗪乙基硫*(代"酸")盐 3,5-Dihydroxytoluene 10510-77-7
F030417 胶体金标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*GOLD
ARB13968 猪胰岛素样生长因子-I(IGF-I)定量分析 Porcine igf-iELISA KIT
M0103 TMB单组份显色液                  
ARB12688 大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)尿液中含量检测 Rat coagulation factor Ⅲ,fⅢ ELISA KIT
RN2901 "Allprep 组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒
ARB11579 人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)Elisa定量检测 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,timp-3 ELISA KIT
2-甲氧基*甲*(代"酸") IUPAC 579-75-9
81-88-9 罗丹明B/玫瑰红B Rhodamine B
67-42-5 EGTA  乙二醇－双－(2－*基乙基)四乙酸
H0601 马血浆(去红细胞、无菌过滤)
胸腺嘧啶 Myokinase 65-71-4
9003-98-9 Deoxyribonuelease I
ARB11578 人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)定量分析 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,timp-2 ELISA KIT

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