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- 详细信息
- 技术资料
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冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Multiplex PCR MasterMix(UNG)
- 库存:
241
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)说明书的品牌:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)说明书
编号:WE0126
品牌:百奥莱博
英文名:Multiplex PCR MasterMix(UNG)
产地:国产|进口
规格:1ml
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸 索即可轻松进行多重PCR反应。
本产品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效 减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。独特的缓冲体系,使多重PCR反 应所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有 助于实现“困难”模板(比如,高GC含量的模板)的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统,可有效去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导 致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成。
本品可有效防止PCR产物的残留污染,适用于防污 染多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
除北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)说明书外,我公司正在打折促销以下产品:
·罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0378
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, TRITC Conjugated
规格:100μl
本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。使用本产品检测灵敏度高,本底低,稳定性好。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,激发后呈现明亮的橙红色荧光。与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
·cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)
编号:WE0133
英文名称:BalbScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
规格:100次
本试剂盒是用于去除基因组DNA进行反转录的试剂盒。该试剂盒在42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制gDNA Eraser的组分,经过 gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行逆转录反应合成cDNA。本试剂盒配有新型高效反转录酶BalbScript,新颖突变位点大幅提升酶的转录活性,cDNA第一链合成的效率和产量更高,可利用pg级的总RNA或mRNA合成cDNA第一链。如逆转录产物cDNA用于下游荧光定量检测,可在42℃,15min完成逆转录反应。本试剂盒适用于第一链cDNA的合成和后续的RT-PCR、RT-qPCR、以及全长cDNA文库的构建等。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| gDNA Eraser | 12.5μl | 50μl |
| 10×gDNA Eraser Buffer | 30μl | 120μl |
| BalbScript,200 U/μl | 25μl | 100μl |
| 5×ScriptRT Buffer | 120μl | 500μl |
| Primer Mix | 30μl | 120μl |
| RNase-Free Water | 1ml | 2×1ml |
产品特点
1、快速去除基因组:含有去除基因组DNA 的gDNA Eraser,只需2min即可除去基因组DNA。
2、快速逆转录:15分钟即可获得荧光定量PCR模板cDNA第一链合成。
3、灵敏度高:可利用pg级总RNA或mRNA模板合成cDNA第一链。
4、高效的逆转录效率:新颖突变位点大幅提升酶活性能,获得更高产量的cDNA。
注意事项:
1、在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。
2、逆转录体系配制在冰上进行操作,防止RNA发生降解。试剂盒的酶使用后尽快置于-20 ºC保存,并尽量避免反复冻融。
3、反应体系可倍比放大,10μl反应体系可最大使用1μg总RNA。
4、Primer Mix由Oligo(dT)和Random primer配制而成, 也可根据实验需要选用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer。
5、若起始RNA的量小于50ng,建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号为WE0223。
6、对于二级结构复杂的RNA模板,建议在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5分钟立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。
操作步骤:
将模板RNA在冰上解冻;试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上。使用前将每种溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。
一、去除基因组DNA反应
1、根据以下表格在冰上配制反应体系,总体积为10μl。为了保证反应液配制的准确性,先按反应数+2的量配制预混体系,然后再分装到每个反应管中,最后加入RNA样品。
| 试剂 | 10μl反应体系 |
| 10×gDNA Eraser Buffer | 1μl |
| gDNA Eraser | 0.5μl |
| RNA Template | 10 pg-1μg |
| RNase-Free Water | up to 10μl |
注意:如果总RNA量大于1μg,请按比例扩大反应体系。若起始RNA的量小于50ng,则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin),该产品货号为WE0223。
2、涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、42℃孵育2分钟(室温反应时,可以延长到30分钟)。
4、反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。
二、逆转录反应
1、根据以下表格在冰上配制反应体系,反应液配制请在冰上进行。为了保证反应液配置的准确性,先按数+2的量配制成预混溶液,然后再分装 10μl到每个反应管中,取配制的预混液10μl加入至已完成去基因组的步骤1反应管中。
| 试剂 | 20μl反应体系 |
| 步骤1反应液 | 10μl |
| BalbScript,200 U/μl | 1μl |
| Primer Mix | 1μl |
| 5×ScriptRT Buffer | 4μl |
| RNase-Free Water | 4μl |
注意:可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer,建议20μl 反应体系Oligo-dT Primer 50pmol,或Gene Specific Primer 2 pmol。
2、混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、cDNA合成反应条件:
1)若下游进行荧光定量PCR检测,42℃孵育15分钟,85℃孵育5分钟。
2)若下游进行普通PCR检测,42℃孵育30-50分钟,85℃孵育5分钟。
注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。
4、反应结束后,短暂离心后置于冰上,再进行后续PCR或荧光定量PCR,如果需要长时间保存,请置于-20℃。
注意:进行Real-time PCR反应时,逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)说明书关键词:Multiplex PCR MasterMix(UNG),防污染多重PCR MasterMix,WE0126,防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)
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