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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻
- 保质期:
长期
- 英文名:
SuperFastRT MasterMix(for Real-Time PCR)
- 库存:
869
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货Real-time RT-PCR MasterMix优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:Real-time RT-PCR MasterMix
品牌:百奥莱博
编号:WE0130
产地:国产|进口
英文名:SuperFastRT MasterMix(for Real-Time PCR)
本品是专为Real-time RT-PCR而研发的快速逆转录试剂混合液。5×SuperQuick RT MasterMix中包含SuperFastRT逆转酶、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer等从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高,可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应,15分钟即可完成荧光定量模板cDNA第一链合成。另外,逆转录反应温度可以提高到50℃,可通读GC含量高和二级结构复杂的RNA模板。本试剂盒操作十分方便快捷,仅需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应,特别适合于高通量检测。
产品组成:
| 组份 | 100次 |
| 5×SuperQuick RT MasterMix | 200μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
产品特点:
1、简便:即用型逆转录Mix,只需加入RNA模板和水,便可进行反应。
2、快速:15分钟完成cDNA第一链合成。
3、反转录效率高:反转录效率高于90%。
4、灵敏度高:pg级模板也可以得到高质量的cDNA。
5、通读复杂模板:GC含量高和二级结构复杂模板。
注意事项:
1、在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。
2、逆转录体系配制在冰上进行操作,防止RNA发生降解。试剂盒的MasterMix使用后尽快置于-20℃保存,并尽量避免反复冻融。
3、反应体系可倍比放大,10μl反应体系可最大使用1μg总RNA。
4、对于二级结构复杂的RNA模板,建议在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。
操作步骤:
1、将模板RNA在冰上解冻;将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上,使用前将每种溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。
2、根据以下表格配制反应体系(反应液配制请在冰上进行),涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
| 试剂 | 10μl反应体系 | 终浓度 |
| RNA Template | Xμl | 1 pg~0.5μg |
| 5×SuperQuick RT MasterMix | 2μl | 1× |
| RNase-Free Water | up to 10μl |
注意:
1)如果总RNA量大于1μg,请按比例扩大反应体系。
2)5×SuperQuick RT MasterMix 中含有Oligo(dT)、Random primer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、RT Buffer等。
3、42℃孵育15分钟。
注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。
4、85℃孵育5分钟,使逆转录酶失活。
5、短暂离心后置于冰上,再进行后续Real-time PCR检测,如果需要长时间保存,请置于-20℃。
注意:进行Real-time PCR反应时,逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:Real-time RT-PCR MasterMix,WE0130,SuperFastRT MasterMix(for Real-Time PCR)
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